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文檔簡介
1、本研究中,我們提取腫瘤源性血管內(nèi)皮細胞的凍融抗原,負載從人外周血擴增的DC。體外實驗檢測DC誘導的CTL對腫瘤血管源性內(nèi)皮細胞的特異性殺傷效應;采用免疫重建的NOD/SCID鼠模型,接種負載抗原的DC疫苗,觀測其對皮下肝癌的抑瘤效應。本研究的目的是利用DC打破機體對腫瘤血管內(nèi)皮細胞的免疫耐受,誘導針對腫瘤血管內(nèi)皮細胞的主動免疫反應,探索一種新的抗腫瘤血管治療方法。 本研究采用膠原酶消化法分離HUVEC。用含人肝癌細胞株HepG2培養(yǎng)
2、上清的條件培養(yǎng)液培養(yǎng)刺激HUVEC增殖,誘導形成腫瘤源性血管內(nèi)皮細胞(Td-EC)。MTS法檢測HepG2培養(yǎng)上清液促HUVEC增殖效應,ELISA法測定HepG2培養(yǎng)上清液中hVEGF含量,免疫組化法結(jié)合圖像分析檢測VEGFR-2在Td-EC的表達,RT-PCR法檢測腫瘤內(nèi)皮標記(TEM)在Td-EC的表達。 本文采用LymphoprepTM分離管分離肝癌患者的外周血單個核細胞,再利用貼壁法去除淋巴細胞,然后用含rhGM-CSF1
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