臍血來源樹突狀細(xì)胞的體外擴(kuò)增及誘導(dǎo)特異性抗卵巢癌免疫.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文臍血來源樹突狀細(xì)胞的體外擴(kuò)增及誘導(dǎo)特異性抗卵巢癌免疫姓名：孫麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：孔北華2001.5.23山東大學(xué)2 0 0 1 碩士學(xué)位論文臍血來源樹突狀細(xì)胞的體外擴(kuò)增及誘導(dǎo)特異性抗卵巢癌免疫研究生導(dǎo) 師孫麗孔北華中文摘要目的研究臍血來源樹突狀細(xì)胞( D C ) 的體外培養(yǎng)擴(kuò)增及誘導(dǎo)特異性抗卵巢癌細(xì)胞的免疫效應(yīng)／方法1 、從臍血中無菌分離單個(gè)核細(xì)胞( M N C s ) 后去除懸浮細(xì)胞j 獲得

2、貼壁單核細(xì)胞( M o ) 。分別在含及不含以下細(xì)胞因子的R P M I 1 6 4 0 培養(yǎng)液中培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化：粒單集落刺激因子( G M —C S F ) 和自介素4 ( I L - 4 ) 、粒單集落刺激因子( G M —C S F ) 、集落刺激因子一1 ( C S F - I ) 和自介素4 ( I L - 4 ) 、 集落刺激因子一I ( C S F 一1 ) 。培養(yǎng)7 d 后收集細(xì)胞應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行表型分析。利用R T

3、- P C R 方法對(duì)培養(yǎng)D c 的C D 8 0 ( B 7 - I ) m R N A 的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。2 、分別在細(xì)胞因子G M - C S F 和I L - 4 ，C S F 一1 和I L 一4 誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化的第三天加入人卵巢癌細(xì)胞株3 A 0 的凍融抗原，共培養(yǎng)4 d 后獲得負(fù)載腫瘤抗原的成熟D C ；將致敏D c 與從臍血中分離的同種異體T 淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)3 d ，獲得細(xì)胞毒T 淋巴細(xì)胞( C T L ) ；四甲基偶氮