癌蛋白p28GANK對(duì)肝癌前體細(xì)胞的調(diào)控作用及機(jī)制研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文癌蛋白p28GANK對(duì)肝癌前體細(xì)胞的調(diào)控作用及機(jī)制研究姓名：錢尤雯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：王紅陽(yáng)201205第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文癌蛋白p28GANK特異性結(jié)合并抑制p28GANK成瘤活性。此外，癌蛋白p28GANK能與泛素蛋白連接酶MDM2相互作用，調(diào)節(jié)P53的泛素化及降解，進(jìn)而抑制P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。臨床統(tǒng)計(jì)提示，癌蛋白p28GANK的表達(dá)水平與肝癌及食管癌患者的預(yù)后相關(guān)，但是目前該基因如

2、何促進(jìn)肝癌及食管癌發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制仍未明了。我室于2001年在國(guó)內(nèi)首次克隆了癌基因p2∥胱，并通過(guò)大量的臨床肝癌樣本的免疫組化檢測(cè)，確認(rèn)其表達(dá)蛋白p28GANK可能為目前己知的具有一定肝癌細(xì)胞特異性的癌蛋白。我組前期研究發(fā)現(xiàn)干擾肝癌細(xì)胞中p28GANK的表達(dá)可明顯抑制細(xì)胞的增殖并可在體內(nèi)外誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡，p28GANK直接結(jié)合NFKB／ReiA，加速NFKB出核，抑制其轉(zhuǎn)錄活性。此外，大鼠2AAF／PH模型誘導(dǎo)的肝卵圓細(xì)胞活化過(guò)程中

3、伴隨著p2∥胱的mRNA和蛋白表達(dá)水平均上升、Rb磷酸化降解以及CDK4／CyclinDI的活化，提示p28GANK可能在肝卵圓細(xì)胞介導(dǎo)的肝再生及肝卵圓細(xì)胞的細(xì)胞周期中發(fā)揮著重要作用；我室新發(fā)現(xiàn)OV6可以做為肝癌前體細(xì)胞的標(biāo)志物，并研究了Wnffpcatenin信號(hào)通路在OV6陽(yáng)性細(xì)胞亞群中的重要調(diào)節(jié)作用。我們觀察到OV6陽(yáng)性的腫瘤性肝前體細(xì)胞中朋儼的mRNA表達(dá)升高，而Rb和p53蛋白表達(dá)下降，這些都提示p28GANK可能與正常和腫瘤

4、性肝前體細(xì)胞的活化存在某種聯(lián)系。腫瘤相關(guān)蛋白調(diào)控腫瘤前體細(xì)胞的增殖和分化可能是腫瘤干細(xì)胞調(diào)控的機(jī)制之一，但是目前尚未見(jiàn)到癌蛋白p28GANK調(diào)控肝癌前體細(xì)胞的相關(guān)報(bào)道，因此，探討癌蛋白p28GANK調(diào)控肝癌前體細(xì)胞活化的分子機(jī)制是本課題研究的重點(diǎn)，旨在加深我們對(duì)腫瘤生物學(xué)的認(rèn)識(shí)，為研發(fā)新的腫瘤治療藥物和方法提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法：1載體及病毒構(gòu)建：構(gòu)建過(guò)表達(dá)p28GANK慢／腺病毒載體、由RNAi介導(dǎo)的低表達(dá)p28GANK的慢／腺病毒載