DNA錯(cuò)配修復(fù)基因缺陷的MSI-H大腸癌頻發(fā)Ki-ras基因點(diǎn)突變.pdf

1、　　目的：Ki-ras突變是在大腸癌較常見(jiàn)的現(xiàn)象。Ki-ras變異熱點(diǎn)12號(hào)密碼子的多種突變均可不同程度的導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化，細(xì)胞獲得生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)終致癌變。本試驗(yàn)擬通過(guò)12號(hào)密碼子突變譜反映基因組中的大量突變現(xiàn)象，并分析其與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性相關(guān)性。本研究旨在揭示微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的本質(zhì)和起源，以及DNA錯(cuò)配修復(fù)缺陷對(duì)大腸癌發(fā)生的影響。 方法：1)HRFMA法測(cè)定大腸癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性。2)PCR擴(kuò)增Ki-ras第一外顯子12，13密碼子為中心的堿

2、基序列。2種引物直接測(cè)序法Ki-ras12，13密碼子部位測(cè)序。3)MSI-H大腸癌的hMLH1和hMSH2基因全長(zhǎng)測(cè)序。4)統(tǒng)計(jì)分析卡方檢驗(yàn)及Fisher精確校驗(yàn)。 結(jié)論：1.Ki-ras12和13號(hào)密碼子突變率在MSI-H，MSI-L及MSS大腸癌間無(wú)顯著差異。2.微衛(wèi)星不穩(wěn)定性大腸癌中檢出的Ki-ras突變譜多為轉(zhuǎn)換突變。這從一個(gè)方面證明了DNA錯(cuò)配修復(fù)缺陷與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及點(diǎn)突變率提升的相關(guān)。3.MSI-H大腸癌中檢出一