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1、目的:利用基因芯片技術(shù)分析電針手少陰心經(jīng)“神門”對急性心肌缺血的基因表達譜的影響以及G蛋白、PKC的變化情況,研究其抗急性心肌缺血的作用機理和與分子基礎(chǔ)。 方法:選擇健康雄性SD大鼠40只,體質(zhì)量220±20g,隨機分為正常對照組、模型組、針刺正常心經(jīng)組、針刺模型心經(jīng)組。大鼠在麻醉狀態(tài)下,采用冠狀動脈結(jié)扎法復(fù)制急性心肌缺血模型,以標準II導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測,J點抬高、血清CK、LDH升高為模型復(fù)制成功標志。選擇1.1mA,2 Hz正
2、負向交替方波,電針刺激,每5min采樣一次,每天電針30min,連續(xù)3天。在距第一次電針48~50h后,選擇每組符合實驗要求的大鼠,10%水合氯醛(0.36ml/100g)腹腔注射麻醉,取左心室缺血區(qū)心肌組織,勻漿、抽提總RNA、純化、定量,取等量RNA混合,采用Affymetrix提供的大鼠全基因U230A系列基因芯片,按照要求進行芯片實驗。用Microarray Suite 信號處理系統(tǒng)分析基因芯片的雜交信號,分析不同樣品中的基因表
3、達,結(jié)合Affymetrix專業(yè)網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫進行數(shù)據(jù)分析。 結(jié)果:在Affymetrix公司提供的大鼠U230A全基因芯片15923個基因和EST中,共篩選出與G蛋白信號通路相關(guān)基因21個,與PKC相關(guān)基因27個。電針心經(jīng)原穴“神門”,可以影響多種G蛋白如Gγ、Gi、G12/13等,和蛋白激酶C如PKCα、ε、η等表達。 結(jié)論:Gng8、Prkar2b、PKCλ和PKChk2可能是電針“神門”抗急性心肌缺血的特異性分子基
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