白藜蘆醇對博萊霉素致大鼠肺纖維化及其HIF-1α和NF-κB表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)和核因子кB(NF-κB)在博萊霉素致大鼠肺纖維化形成中的作用及白藜蘆醇(Res)對HIF-1α和NF-κB表達(dá)的影響。
　　方法：90只雌性SD大鼠隨機(jī)分為6個(gè)組,每組15只,分別為對照組、模型組、Res低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100mg/kg)劑量干預(yù)組及地塞米松(DM3mg/kg)干預(yù)組。通過氣管內(nèi)注入BLM制備肺纖維化大鼠模型,觀察各組大鼠肺組織炎癥及纖維

2、化病變,檢測肺組織中羥脯氨酸(HYP)含量,分別采用免疫組織化學(xué)和RT-PCR方法方法測定肺組織中HIF-1α和NF-κB含量及其mRNA水平。
　　結(jié)果：
　　1、肺組織 HE染色、Masson染色 HE染色:對照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常,間質(zhì)未見膠原沉積。模型組及Res低劑量組大鼠肺組織7天時(shí)肺泡炎明顯,肺泡腔大量炎性細(xì)胞滲出,肺間質(zhì)少量膠原沉積;14天時(shí)肺泡炎減輕,肺泡間隔增寬并見成纖維細(xì)胞增生、膠原沉積、肺泡腔縮小;28

3、天時(shí)穩(wěn)定的肺纖維化形成,有部分炎癥細(xì)胞浸潤。Res高、中劑量組及DM干預(yù)組肺組織病理變化均較模型及Res低劑量組明顯較輕。Masson染色:對照組大鼠肺組織支氣管壁膠原纖維較薄,肺泡壁間隔有少量膠原纖維沉著。模型組及Res低劑量組肺組織,隨著時(shí)間推移,肺間質(zhì)、支氣管壁及其周圍膠原纖維明顯增多;7天時(shí),膠原纖維主要分布在支氣管及小血管周圍,肺泡間隔未見明顯膠原纖維;28天時(shí),模型組支氣管和小血管周圍膠原纖維明顯增多,大量肺間質(zhì)膠原纖維呈片

4、狀及束狀分布,甚至部分肺泡腔被膠原纖維充填。Res高、中劑量組及DM干預(yù)組肺組織病理變化均較模型及Res低劑量組明顯減輕。
　　2、HYP含量模型組HYP含量隨造模時(shí)間的延長逐漸增高,自14天開始HYP升高明顯,28天達(dá)到最高值,與對照組比較差異有顯著性(P<0.05),與Res低劑量組比較差異無顯著性(P>0.05);而Res中劑量組、高劑量組及DM干預(yù)組 HYP含量呈低水平增高;三組7天、14天、28天HYP含量均高于對照組而

5、明顯低于模型組與Res低劑量組(P<0.05);三組間HYP含量差異無顯著性(P>0.05)。
　　3、HIF-1α及其mRNA在肺纖維化過程中的表達(dá) HIF-1α在7天、14天、28天時(shí)模型組及干預(yù)組均有表達(dá),對照組偶有弱表達(dá),各組與對照組差異有顯著性(P<0.05)。7天時(shí),模型組、Res低劑量組之間及與Res中劑量組、Res高劑量組、DM干預(yù)組各組之間差異有顯著性(P<0.05),Res中劑量組、Res高劑量組、DM干預(yù)組三

6、組之間差異無顯著性(P>0.05);14天時(shí),模型組與Res低、中劑量組之間差異無顯著性(P>0.05),Res高劑量組、DM組HIF-α表達(dá)較之三組明顯減弱,差異有顯著性(P<0.05),Res高劑量組、DM組之間差異無顯著性(P>0.05);28天時(shí),Res各干預(yù)組之間差異無顯著性(P>0.05),較模型組明顯減弱(P<0.05),仍高于DM干預(yù)組(P<0.05)。
　　4、NF-κB及其mRNA在肺纖維化過程中的表達(dá) NF-

7、κB和NF-κBmRNA在正常大鼠肺組織呈弱表達(dá);模型組及Res低劑量組表達(dá)增強(qiáng),以第28天最明顯,各時(shí)間點(diǎn)與正常組比較差異有顯著性(P<0.05);模型組與Res低劑量組比較差異無顯著性(P>0.05);Res高、中劑量組及DM干預(yù)組變化趨勢與模型組及Res低劑量組類似,但表達(dá)水平均低于同時(shí)間組的模型組及Res低劑量組(P<0.05),三組間比較差異無顯著性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.HIF-1α在大鼠肺纖維化