高糖環(huán)境下OREBP在晶狀體上皮細胞中的表達及調控機制.pdf

1、目的:探討滲透壓反應元件結合蛋白（smotic response element binding protein，OREBP）在人晶狀體上皮細胞（HLEC）中的表達及在高糖環(huán)境下的表達變化及調控機制，明確其在晶狀體上皮細胞中的作用。
　　方法:（1）體外培養(yǎng)人的晶狀體上皮細胞系SRA01/04，分為兩組：正常對照組，葡萄糖濃度為25mmol/L,高糖培養(yǎng)組，葡萄糖濃度為300mmol/L,用Real-time RT-PCR和wes

2、tern blot檢測高糖刺激后細胞內OREBP的表達變化。然后用ERK、P38抑制劑預處理HLEC45分鐘后再培養(yǎng)于300mmol/L葡萄糖培養(yǎng)液中，用Real-time RT-PCR，western blot檢測細胞內OREBP的表達變化。（2）收集2013年10月到2014年4月在青島大學附屬醫(yī)院眼科就診并行phaco+IOL植入手術的白內障患者的晶狀體前囊膜，以103例（103眼）糖尿病患者前囊膜為病例組，154例（154眼）非

3、糖尿病患者囊膜為對照組，以10例（10眼）無償捐獻的透明囊膜為空白對照。應用Real-time PCR技術檢測各組前囊膜組織中OREBP mRNA的表達，免疫熒光技術檢測OREBP蛋白水平的表達。（3）STZ誘導SD大鼠2型糖尿病模型，分別于2周、4周、8周、10周、12周斷頭法處死后取晶狀體前囊膜用Real-time RT-PCR檢測OREBP的表達變化。
　　結果:（1）OREBP在人晶狀體上皮細胞表達，高糖刺激后OREBP

4、mRNA及蛋白表達明顯升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；ERK,P38抑制劑預處理后，高糖刺激晶狀體上皮細胞后OREBPmRNA及蛋白表達未發(fā)生明顯升高，前后差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；（2）OREBP在糖尿病患者晶狀體前囊膜組織中表達高于健康白內障患者，且二者均高于透明囊膜。（3）糖尿病大鼠晶狀體囊膜組織中OREBP mRNA表達于2周時升高最為顯著，后逐漸下降，但始終高于健康大鼠囊膜組織。
　　結論:（