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1、糖尿病已成為全球發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一,一旦發(fā)病終生不能痊愈,其并發(fā)癥嚴(yán)重威脅著患者的健康,木蝴蝶種子提取物與阿卡波糖聯(lián)用可以降低餐后血糖,木蝴蝶有效成分的加入,可以使阿卡波糖的用量大幅度降低,但其機(jī)理并不清楚,本論文的目標(biāo)是揭示木蝴蝶種子提取物和阿卡波糖協(xié)同降低小鼠餐后血糖的作用機(jī)制,并優(yōu)化體內(nèi)實(shí)驗(yàn)給藥的最佳作用方式。
首先,灌胃淀粉前1h給藥與灌胃淀粉同時(shí)給藥相比,木蝴蝶與阿卡波糖的協(xié)同降糖效果無顯著性差異,表明木蝴
2、蝶與阿卡波糖的協(xié)同降餐后血糖作用主要抑制小腸內(nèi)的淀粉水解,不涉及入血后的其他機(jī)制??疾炝艘喳溠刻?、淀粉為底物時(shí)候木蝴蝶與阿卡波糖聯(lián)用對(duì)于大鼠小腸α-糖苷酶的抑制作用。二者的聯(lián)用不論在高劑量還是低劑量均能表現(xiàn)出協(xié)同作用。以淀粉為底物,將單用抑制率為43%,劑量為40μg/mL的木蝴蝶與0.02μg/mL抑制率為38%的阿卡波糖聯(lián)用,抑制率達(dá)到75%,高于0.4μg/mL阿卡波糖單用的70%。以麥芽糖為底物,將單用抑制率為31%,劑量為40
3、μg/mL的木蝴蝶和抑制率為50%劑量為0.04μg/mL的阿卡波糖聯(lián)用,抑制率達(dá)到74%,超過了阿卡波糖單用200倍劑量(8μg/mL)的抑制率。不同濃度的OISE和阿卡波糖聯(lián)用時(shí)協(xié)同指數(shù)(CI)值為0.24~0.98,且該值隨著OISE的濃度提高而降低,當(dāng)OISE的濃度為40μg/mL時(shí),和不同濃度的阿卡波糖聯(lián)用的CI值達(dá)到了0.3左右,表現(xiàn)為強(qiáng)協(xié)同,且以淀粉和麥芽糖為底物的CI值相當(dāng),提示木蝴蝶與阿卡波糖的協(xié)同作用主要針對(duì)麥芽糖水
4、解。
其次,考察了木蝴蝶種子提取物與阿卡波糖聯(lián)用對(duì)于豬胰腺淀粉酶和酵母源α-葡萄糖苷酶的抑制作用。對(duì)于酵母源α-葡萄糖苷酶,木蝴蝶的單用IC50值為312μM,阿卡波糖的IC50值為1.23 mM。兩抑制劑聯(lián)用,高劑量表現(xiàn)為拮抗作用。對(duì)于豬胰腺α-淀粉酶,木蝴蝶單用時(shí)無抑制作用。阿卡波糖單用對(duì)α-淀粉酶有較強(qiáng)抑制作用,其IC50值約為7μg/mL。二者聯(lián)用無協(xié)同抑制作用,木蝴蝶的加入,可降低阿卡波糖的抑制率,但在阿卡波糖濃度較
5、高時(shí)這種降低抑制率的作用不明顯??疾炝四竞麑?duì)于小腸葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的作用,結(jié)果表明木蝴蝶對(duì)于小腸葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)有一定促進(jìn)作用。
最后,優(yōu)化了最佳給藥方式、提取條件并考察了藥材來源對(duì)降低餐后血糖的影響。確定最優(yōu)淀粉給藥方式為灌胃2 g/kg淀粉糊??疾炝藦V西、貴州、云南、青海不同產(chǎn)地木蝴蝶90%乙醇水提取物與阿卡波糖聯(lián)用降糖活性的差異。其中除產(chǎn)地為青海的木蝴蝶聯(lián)用后降糖效果不明顯外,其他各組聯(lián)用藥物與阿卡波糖單用組相比,小鼠餐后30 m
6、in、60 min血糖均有顯著性差異(p<0.05)。產(chǎn)地為貴州的木蝴蝶協(xié)同效果最好??疾炝?00%、90%、75%、50%、0%不同濃度乙醇水溶液提取木蝴蝶與阿卡波糖聯(lián)用降餐后血糖的效果差異。其中除0%組餐后血糖變化無顯著性差異外,其他各聯(lián)用組與阿卡波糖組相比均能表現(xiàn)出協(xié)同降低餐后30 min、60 min血糖的作用,且具有顯著性差異(p<0.05),75%組協(xié)同效果最好,表現(xiàn)為極顯著性差異(p<0.01)。
本研究證明了木
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