辛伐他汀對(duì)粥樣硬化性病變大鼠血漿內(nèi)皮脂肪酶水平的影響及意義.pdf

1、研究目的：
　　 本課題旨在研究內(nèi)皮脂肪酶(endotheliallipase，EL)在動(dòng)脈粥樣硬化病變大鼠血漿中的水平，以及經(jīng)辛伐他汀治療后EL的變化情況，并對(duì)EL與丙種反應(yīng)性蛋白(C-reactiveprotein，CRP)、高密度脂蛋白膽固醇(highdensitylipoproteincholesterol，HDL-C)、斑塊面積、管腔內(nèi)徑進(jìn)行相關(guān)性分析，從而探討EL在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用及辛伐他汀對(duì)EL水平影響在抗動(dòng)脈

2、粥樣硬化中的作用。通過對(duì)血漿EL水平抑制可能為治療動(dòng)脈粥樣硬化性心血管病提供新的策略。以期為動(dòng)脈粥樣硬化患者的診斷、治療及預(yù)后帶來福音。
　　 研究方法：
　　 1.動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型的構(gòu)建SD大鼠30只采用隨機(jī)數(shù)字表法分為3組，每組10只，對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)；動(dòng)脈粥樣硬化組和辛伐他汀組(合稱造模組)均給予高脂喂飼，并給予牛血清白蛋白+卵清白蛋白血管免疫刺激+大劑量維生素D3灌胃+高脂飼料喂飼造模。
　　

3、2.分別于喂養(yǎng)第1d、6w、12w結(jié)束時(shí)檢測三組大鼠血漿血脂、CRP和EL水平，第6w、12w結(jié)束時(shí)進(jìn)行頸總動(dòng)脈超聲檢查，評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化模型是否造模成功，不成功大鼠剔除。
　　 3.成模大鼠繼續(xù)高脂喂養(yǎng)，成模的辛伐他汀組大鼠用辛伐他汀(2.5mg/kg.d)溶入1ml生理鹽水灌胃，其余各組則以等量的生理鹽水灌胃，連續(xù)灌胃8w。
　　 4.在喂養(yǎng)第16w和20w結(jié)束時(shí)對(duì)三組大鼠進(jìn)行頸總動(dòng)脈超聲檢查，軟件分析得出管腔最狹窄

4、處內(nèi)徑和斑塊面積大小，并檢測三組大鼠喂養(yǎng)第16w和20w結(jié)束時(shí)血漿HDL-C、低密度脂蛋白膽固醇(lowdensitylipoproteincholesterol，LDL-C)、甘油三酯(triglycerides，TG)、總膽固醇(totalcholesterol，TC)、CRP和EL水平，第20w結(jié)束后麻醉下活體取大鼠頸總動(dòng)脈并對(duì)頸總動(dòng)脈切片HE染色觀察病理學(xué)變化。
　　 5.對(duì)造模成功大鼠的血漿EL濃度與HDL-C、CRP

5、、斑塊面積和管腔內(nèi)徑進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 6.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法：數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間比較采用單因素方差分析，方差齊性用SNK方法比較；方差不齊用Dunnett’s方法比較。兩個(gè)指標(biāo)間相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。數(shù)據(jù)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的造模高脂喂養(yǎng)第6w和12w后，造模組大鼠血漿TG、TC、LD

6、L-C、CRP、EL水平均明顯高于造模組第1d(P<0.01)的水平，而HDL-C水平低于造模組第1d的水平(P<0.05)。高脂喂養(yǎng)第6w時(shí)的血脂水平、CRP、EL水平與高脂喂養(yǎng)第12w時(shí)無明顯差異。第6w結(jié)束時(shí)頸總動(dòng)脈超聲未見明顯動(dòng)脈粥樣硬化樣改變，而第12w結(jié)束時(shí)的頸總動(dòng)脈超聲顯示：動(dòng)脈粥樣硬化組及辛伐他汀組頸總動(dòng)脈內(nèi)膜明顯增厚，表面不光滑，連續(xù)性中斷，呈現(xiàn)不均勻的低回聲區(qū)。提示大鼠在12w造模成功。
　　 2.三組大鼠喂

7、養(yǎng)20w結(jié)束時(shí)血脂、CRP、EL比較喂養(yǎng)20w結(jié)束時(shí)檢測三組大鼠血漿血脂、CRP、EL水平，結(jié)果顯示：(1)動(dòng)脈粥樣硬化組與對(duì)照組比較：血TC、TG、LDL-C、CRP、EL水平顯著升高(P<0.01)，而HDL-C水平降低(P<0.05)。(2)辛伐他汀組與動(dòng)脈粥樣硬化組比較：TC、TG、LDL-C、CRP、EL水平顯著降低(P<0.01)，而HDL-C水平升高(P<0.05)。(3)辛伐他汀組與對(duì)照組比較：血TG水平顯著升高(P<0

8、.01)，而血漿TC、HDL-C、LDL-C、CRP、EL水平無明顯變化(P>0.05)。
　　 3.辛伐他汀組第12w、16w、20w結(jié)束時(shí)血脂和CRP、EL比較發(fā)現(xiàn)，(1)16w與12w比較，TC、TG、LDL-C、EL明顯降低(P<0.01)，CRP雖有降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而HDL-C雖有升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)20w與16w比較，TC、LDL-C、CRP、EL明顯降低(P<0.01)

9、，而TG、HDL-C無明顯變化(P>0.05)。(3)20w與12w比較，TC、TG、LDL-C、CRP、EL明顯降低(P<0.01)，而HDL-C雖有升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4.EL與血漿HDL-C、CRP、斑塊面積、管腔內(nèi)徑的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，EL與HDL-C水平呈明顯負(fù)相關(guān)，與管腔內(nèi)徑呈明顯的負(fù)相關(guān)，與CRP水平呈明顯正相關(guān)，與斑塊面積呈明顯正相關(guān)。
　　 5.頸總動(dòng)脈超聲顯示辛伐他汀組第12w

10、、16w、20w時(shí)的斑塊面積(mm2)分別為：2.01±0.03、1.66±0.06、1.13±0.03，兩兩相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。辛伐他汀組第12w、16w、20w時(shí)的管腔內(nèi)徑(mm)分別為0.65±0.03、0.75±0.03、0.92±0.03，兩兩相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　 6.頸總動(dòng)脈切片HE染色，20w結(jié)束時(shí)頸總動(dòng)脈切片HE染色顯示：對(duì)照組大鼠血管內(nèi)膜光滑，連續(xù)性好。而動(dòng)脈粥樣硬化組和辛

11、伐他汀組大鼠頸總動(dòng)脈HE染色顯示呈不同程度動(dòng)脈粥樣硬化改變。但辛伐他汀組病變程度明顯較動(dòng)脈粥樣硬化組減輕。
　　 結(jié)論：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)研究通過牛血清白蛋白+腹腔注射卵清白蛋白刺激免疫+高脂喂養(yǎng)+大劑量維生素D3灌胃的改良方法成功建立動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型。
　　 2.在動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血漿中EL、CRP水平升高，血漿HDL-C濃度降低，頸總動(dòng)脈斑塊面積增大，管腔內(nèi)徑縮小，相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)EL與CRP、斑塊面積呈正