色氨酸羥化酶基因-T457C位點(diǎn)遺傳多態(tài)性與抑郁癥的相關(guān)性及法醫(yī)學(xué)意義.pdf

1、5-羥色胺(5-hydroxytrptamine，5-HT)廣泛分布于體內(nèi)各組織，作為中樞神經(jīng)遞質(zhì)之一，參與多種中樞神經(jīng)活動(dòng)，如情緒控制，睡眠調(diào)節(jié)，焦慮，酒精中毒，攝食，性行為等。5-HT代謝失調(diào)可導(dǎo)致多種精神紊亂癥狀，多種酶類(lèi)、受體、載體等，都會(huì)影響5-HT的生理代謝過(guò)程及其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常調(diào)控作用；其中，色氨酸羥化酶能否正常表達(dá)具有重要的意義。 色氨酸羥化酶(Tryprophan hydroxylase，TPH)是5-H

2、T合成的限速酶，催化色氨酸生成5-羥色氨酸。TPH基因表達(dá)狀況決定5-HT的生物合成，增強(qiáng)或減弱5-HT及其代謝物的作用強(qiáng)度，進(jìn)而影響它在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能。 TPH基因位于常染色體11p15.3-p14，全長(zhǎng)29kbp，有13個(gè)外顯子，編碼由444個(gè)氨基酸組成的TPH。基因序列內(nèi)存在多個(gè)遺傳多態(tài)性位點(diǎn)，分布于上游啟動(dòng)區(qū)、內(nèi)含子1B區(qū)、IC區(qū)、內(nèi)含子7、內(nèi)含子8及內(nèi)含子9區(qū)。 本研究選擇位于TPH基因第八內(nèi)含子的-T45

3、7C位點(diǎn)調(diào)查其在中國(guó)漢族、藏族群體中的遺傳多態(tài)性，并探討在法醫(yī)學(xué)個(gè)人識(shí)別中的意義及與抑郁癥的相關(guān)性。 材料與方法： 根據(jù)文獻(xiàn)訂購(gòu)引物，應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增TPH基因第八內(nèi)含子的-T457C位點(diǎn)，采用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析法，以NlaIII限制性內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，聚丙烯酰胺凝膠電泳分離并結(jié)合銀染顯帶的方法，對(duì)284例中國(guó)北方漢族個(gè)體、142例藏族個(gè)體、111例抑郁癥個(gè)體進(jìn)行-T457C位點(diǎn)基因分型，并選擇部

4、分樣本進(jìn)行測(cè)序分析，以驗(yàn)證RFLP分型結(jié)果的準(zhǔn)確性。 結(jié)果： TPH基因-T457C位點(diǎn)PCR產(chǎn)物經(jīng)NlaIII限制性內(nèi)切酶消化、電泳后，共檢出三種譜型，分別為T(mén)T型、CT型、CC型，DNA測(cè)序分析證實(shí)分型結(jié)果準(zhǔn)確。在中國(guó)北方漢族群體中，TT型60例(0.211)，CT型148例(0.521)，CC型76例(0.268)；T等位基因的頻率為0.472，C等位基因的頻率為0.528。142例藏族個(gè)體中，TT型30例(0.2

5、11)，CT型64例(0.451)，CC型48例(0.338)；T等位基因的頻率為0.437，C等位基因的頻率為0.563。111例抑郁癥患者中TT型31例(0.279)，CT型51例(0.460)，CC型29(0.261)：T等位基因的頻率為0.509，C等位基因的頻率為0.491。 討論： TPH基因-T457C位點(diǎn)在中國(guó)北方漢族、藏族群體中的遺傳多態(tài)性分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。其DP值分別為0.

6、612、0.638，H值分別0.521、0.451，EPP值分別為0.187、0.185。該位點(diǎn)在漢族、藏族群體中隸屬高等鑒別能力的遺傳標(biāo)記系統(tǒng)。 抑郁癥患者與中國(guó)北方漢族健康人群相比，二者的等位基因頻率和基因型頻率分布沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。但是，患者組T等位基因及TT純合子頻率均明顯高于對(duì)照組；而且，健康對(duì)照組女性與患者女性相比，TT純合子頻率分布有顯著差異(P=0.029)，提示TPH基因-T457C位點(diǎn)的等位基因

7、T可能與抑郁癥有關(guān)。 漢族與藏族相比，等位基因頻率無(wú)顯著性差異(P>0.05)；二者分別與法國(guó)人群比較，則均表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.001，P=0.050)，提示TPH基因座-T457C位點(diǎn)的遺傳多態(tài)性分布存在種族差異。 結(jié)論： TPH基因-T457C位點(diǎn)在中國(guó)北方漢族、藏族群體中具有較好的遺傳多態(tài)性，在法醫(yī)學(xué)個(gè)人識(shí)別和親子鑒定中具有較高的應(yīng)用價(jià)值；該位點(diǎn)可作為人類(lèi)遺傳學(xué)研究的重要遺傳標(biāo)記；推測(cè)該位點(diǎn)等位基因T