小鼠免疫抑制模型篩選及球孢枝孢霉的小鼠致病性研究.pdf

1、[目的]
　　 1.篩選適用于真菌致病性研究的環(huán)磷酰胺(CTX)誘導(dǎo)免疫抑制小鼠模型。
　　 2.構(gòu)建局部和系統(tǒng)性球孢枝孢霉感染小鼠模型，探討球孢枝孢霉對小鼠的致病特點。
　　 [方法]
　　 1.環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠免疫抑制模型篩選：BALB/c小鼠間隔2 d兩次腹腔注射50-200 mg/kg CTX，在注射前后不同時間點采集靜脈血，用全自動血細胞分析儀、三色法流式細胞術(shù)分別檢測白細胞(WBC)、淋巴細胞

2、(Ly)及其亞群變化。
　　 2.球孢枝孢霉的小鼠致病性研究：通過擦皮、皮下注射、靜脈注射法給免疫正常、免疫抑制小鼠接種球孢枝孢霉，分別對皮損和內(nèi)臟進行真菌逆培養(yǎng)、組織病理檢查，并測定肺組織載菌量。
　　 [結(jié)果]
　　 1.環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠免疫抑制模型篩選：
　　 各組小鼠WBC、Ly計數(shù)在首次注射CTX后1 d(T1)及4 d(T4)均有明顯下降，其中T4時間點降低最明顯，且劑量越大降低越明顯；在第二

3、次注射CTX后7 d(T7)明顯回升；在第二次注射后14 d(T14)再次出現(xiàn)下降。各組小鼠外周血CD3+、CD3-CD19+、CD3-CD56+細胞百分率和CD4+/CD8+比值在T4時間點均有明顯下降，其中CD3+、CD3-CD56+細胞百分率和CD4+/CD8+比值降至最低，且劑量越大降低越明顯。CD3+、CD3-CD56+細胞百分率和CD4+/CD8+比值在T7H寸間點回升，而CD3-CD19+細胞百分率降至最低。
　　

4、 2.球孢枝孢霉的小鼠致病性研究：
　　 (1)擦皮組：接種部位出現(xiàn)紅腫、糜爛、結(jié)痂；免疫抑制組小鼠的皮損面積和真菌逆培養(yǎng)陽性率明顯大于免疫正常組(54.40±16.26 vs8.85±2.53，P<0.01；90％vs40％，P<0.01)。
　　 (2)皮下注射組：接種部位出現(xiàn)結(jié)節(jié)、潰瘍；免疫抑制組小鼠的皮損面積明顯大于免疫正常組(33.45±7.53 vs6.70±1.89，P<0.01)。
　　 (3)靜

5、脈注射組：免疫抑制組小鼠的肺、脾、肝、腎、心真菌逆培養(yǎng)陽性率分別為90％、65％、60％、50％、20％，而正常免疫組分別為40％、25％、25％、15％、5％，兩組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01-0.05)。免疫抑制組小鼠肺組織載菌量明顯大于免疫正常組(39.20±16.02 vs9.15±9.50)(P<0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.間隔2天兩次腹腔注射CTX150 mg/kg可誘導(dǎo)BALB/c小鼠出現(xiàn)明