從海洋小單孢菌中篩選免疫抑制劑.pdf

1、用四種分離培養(yǎng)基和選擇性分離方法從157份來自福建、浙江、海南和山東省的海灘土、海洋沉積物、海洋生物樣品中分離到742株海洋小單孢菌。這些海洋小單孢菌產(chǎn)生許多不同的次級代謝產(chǎn)物，30％菌株產(chǎn)生的化合物有抗革蘭氏陽性菌(G+)活性、7％有免疫抑制活性、3％抗真菌、2％抗結(jié)核桿菌、l％抗革蘭氏陰性菌(G-)。 在從海洋小單孢菌篩選免疫抑制劑過程中，從小單孢菌Micromonosporasp．FIM02-635的發(fā)酵液中獲得兩個(gè)具有免

2、疫抑制的活性物質(zhì)FW63511和FW63512。產(chǎn)生菌FIM02-635經(jīng)分類鑒定為碳樣小單孢菌MicromonosporacarbonaceaFIM02-635，其16SrDNA在美國國立衛(wèi)生研究院全國生物技術(shù)研究中心(NCBI)的DNA數(shù)據(jù)庫序列號為GenBankAY697299。它的代謝產(chǎn)物FW63511和FW63512經(jīng)理化性質(zhì)研究、紫外、紅外、核磁共振氫譜(IH)、碳譜(13C)、13C極化轉(zhuǎn)移譜(13CDEPT)分析證明它們

3、分別與大豆黃素(Daidzein)和染料木素(Genistein)同質(zhì)，這是首次從海洋小單孢菌次級代謝產(chǎn)物中分離到陸地植物來源的生物活性物質(zhì)。這兩個(gè)化合物具有免疫抑制活性和抗腫瘤活性而無抗菌作用。 在篩選過程中，從海洋小單孢菌Micromonosporasp．FIM02-523發(fā)酵液提取純化獲得有免疫抑制活性的脂肽類化合物FW523。產(chǎn)生菌FIM02-523經(jīng)分類鑒定為青銅小單孢菌MicromonosporachalceaFIM

4、02-523，其16SrDNA在NCBI的DNA數(shù)據(jù)庫序列號為GenBankDQl26264。FW523含5個(gè)組分，組分3(FW523-3)經(jīng)理化性質(zhì)研究、核磁共振氫譜(1H)、碳譜(13C)分析證明它與已知抗腫瘤抗生素RakicidinB同質(zhì)。本文首次發(fā)現(xiàn)FW523-3(RakicidinB)能夠抑制腫瘤細(xì)胞微絲的合成、降低線粒體膜電位，首次發(fā)現(xiàn)它具有與環(huán)孢菌素(CyclosporinA)相當(dāng)?shù)拿庖咭种苹钚?。還分離純化獲得兩個(gè)Raki