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1、目的:觀察丹參素對活化的大鼠肝星狀細胞(HSC)氨基末端蛋白(JNK)的抑制作用,探討其抗肝纖維化作用的機制。 方法:采用膠原酶原位循環(huán)灌流法分離大鼠原代HSC,體外培養(yǎng)。分離大鼠原代HSC,用不同濃度丹參素作用于HSC,四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測丹參素對HSC生長增殖的抑制作用;免疫細胞化學(xué)法觀察Ⅰ型膠原合成,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)觀察Ⅰ型膠原分泌。Western blot法觀察丹參素對白細胞介素-1β(IL-1β
2、)刺激的HSC內(nèi)JNK蛋白及磷酸化JNK蛋白表達的影響。 結(jié)果:與0mmol/L組比較,丹參素其它濃度組明顯抑制了HSC增殖,并呈劑量依賴性。丹參素(0.0625~0.25 mmol/L)對IL-1β引起的HSC增殖具有明顯的抑制作用,并呈劑量依賴性(P<0.05)。0.25 mmol/L丹參素對正常培養(yǎng)的和經(jīng)IL-1β刺激的HSC作用24小時能下調(diào)Ⅰ型膠原的合成和分泌(P<0.01)。IL-1β能刺激HSC中P-JNK的明顯表
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