丹參素對PDGF-BB刺激下大鼠肝星狀細胞的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：觀察丹參素對血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)刺激下大鼠肝星狀細胞(HSC)活化增殖，Ⅰ、Ⅲ型膠原合成與分泌，細胞外信號調節(jié)激酶1/2(ERK1/2)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)蛋白表達的影響。分析丹參素抑制肝纖維化的分子機制。
　　方法：采用鏈霉蛋白酶-膠原酶二步消化法提取大鼠HSC，α-SMA免疫細胞化學染色鑒定提取的HSC。用不同濃度丹參素(0.25、0.125、0.062mmol/L)、ERK通道特異性

2、抑制劑U0126(20nmol/L)和PI3K通道特異性抑制劑LY294002(20nmol/L)分別作用于PDGF-BB(10ng/ml)誘導的HSC24小時，CCK-8法觀察HSC增殖活性，免疫化學染色法檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原合成，ELISA法測定分泌Ⅰ、Ⅲ型膠原的量，Westernblot分析erk1/2、p-erk1/2、akt和p-akt蛋白表達。
　　結果：原代提取的HSC約為3.32×107/鼠，存活率大于97％。傳一代的

3、HSC純度大于99％。PDGF-BB10ng/ml處理后，HSC增殖明顯增加，丹參素能抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖的作用，并隨丹參素濃度增加細胞增殖受到的抑制作用越強(P<0.05)，Ⅰ、Ⅲ型膠原合成及分泌均顯著減少(P<0.05)，p-erk1/2和p-akt蛋白表達均顯著降低(P<0.05)。
　　結論：原代提取的大鼠HSC是體外研究肝纖維化良好的實驗模型。丹參素可通過抑制PDGF-BB誘導的HSC增殖和活化，同時抑制

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