丹參素對肝星狀細胞TGFβ1-Smads-ERK信號通路的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討丹參素對肝星狀細胞(HSC)的轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)/Smads/細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路的影響及其相互關(guān)系。
　　 方法:體外分離培養(yǎng)大鼠HSC,MTT法篩選丹參素最適濃度;以最適濃度丹參素及ERK阻斷劑(PD98059)作用于經(jīng)TGFβ1處理的HSC,CCK-8法檢測

2、各組HSC增殖;免疫細胞化學(xué)染色法檢測各組HSC的α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型膠原;RT-PCR檢測各組HSC的Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表達;Westem blot法檢測各組Smad2/3、ERK1/2蛋白磷酸化及Smad7蛋白水平。
　　 結(jié)果:0.0625-0.25mmol/L的丹參素可有效抑制HSC增殖,作為最適處理濃度;PD98059(100μ

3、mol/L)抑制TGFl3l誘導(dǎo)的HSC增殖(P＜0.01),丹參素劑量依賴性抑制TGFβ1誘導(dǎo)的HSC增殖(P＜0.01);TGFl3I促進細胞內(nèi)α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型膠原表達(P＜0.01),PD98059及丹參素降低TGFβ1誘導(dǎo)的α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型膠原水平(P＜0.01);PD98059可拮抗TGFβ1誘導(dǎo)的Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表達(P＜0.05,P＜0.01),丹參素下調(diào)Smad2、Smad3 mRNA

4、水平,但上調(diào)Smad7 mRNA水平(P＜0.01);PD98059及丹參素抑制TGFβ1誘導(dǎo)的Smad2/3、ERK1/2蛋白磷酸化(P＜0.01),但對TGFβ1誘導(dǎo)的Smad7蛋白表達上調(diào)有不同效應(yīng)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:TGFβ1上調(diào)Smad2、Smad3 mRNA表達及蛋白磷酸化,進而誘導(dǎo)HSC增殖、活化及膠原合成。ERK通路可能參與HSC中TGFβ1誘導(dǎo)Smad基因表達及蛋白磷酸化過程。丹參素對TGFβ/Sm

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