二烯丙基二硫?qū)Υ笫蟾涡菭罴?xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)合成及TGF-β1-Smad信號通路的影響.pdf

1、目的:研究二烯丙基二硫（DADS）對大鼠肝星狀細(xì)胞 HSC-T6的細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響以及對TGF-β1/Smad信號通路的影響。
　　方法:(1)將已激活的大鼠肝星狀細(xì)胞 HSC-T6隨機(jī)平均分為5組：溶媒對照組（A）、DADS不同濃度干預(yù)組（B:20mg/L、C:40 mg/L、D:80 mg/L）、2.5×10-7M秋水仙堿組(E)；
　　(2)酶聯(lián)免疫吸附法（Elisa）檢測細(xì)胞外基質(zhì)主要組成成分Ⅰ型膠原(ColⅠ)

2、及透明質(zhì)酸(HA)的表達(dá)。
　　(3)通過 RT-PCR法、Western blot法分別從轉(zhuǎn)錄及蛋白水平對TGF-β1/Smad信號通路中相關(guān)蛋白TGF-β1、Smad3、pSmad3及Smad7的表達(dá)進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果:（1）DADS能抑制大鼠肝星狀細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrixc， ECM）Ⅰ型膠原(ColⅠ)及透明質(zhì)酸(HA)的合成，且呈現(xiàn)出濃度依賴效應(yīng)。Elisa結(jié)果顯示 DADS（20

3、mg/L、40 mg/L、80 mg/L）、秋水仙堿分別作用于HSC-T6細(xì)胞48h后，與溶媒對照組相比， ColⅠ及 HA合成均明顯減少（P<0.05），差異有顯著性。
　?。?）RT-PCR結(jié)果顯示：TGF-β1 mRNA表達(dá)40 mg/L組、80 mg/L組、秋水仙堿組與溶媒對照組相比明顯減少（P<0.05），差異有顯著性，80 mg/L組減少最為明顯；20 mg/L組較溶媒對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Smad3

4、 mRNA表達(dá)各組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　?。?）Western blot結(jié)果顯示：TGF-β1蛋白、pSmad3蛋白表達(dá)40mg/L組、80 mg/L組、秋水仙堿組與溶媒對照組相比均明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），80 mg/L組蛋白表達(dá)下降最為明顯，20 mg/L組較溶媒對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Smad3蛋白表達(dá)各組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;Smad7蛋白表達(dá)40 mg