槐耳浸膏誘導(dǎo)人胃腺癌細(xì)胞株MKN28、MKN45凋亡機(jī)制研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)不同濃度槐耳浸膏與不同分化水平胃癌細(xì)胞相互作用，檢測(cè)Bcl-2、Caspase-3、Fas mRNA及蛋白在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)水平，從而探討槐耳浸膏誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞凋亡分子調(diào)控機(jī)制。為槐耳浸膏在臨床治療胃癌提供切實(shí)的理論依據(jù)。
　　 方法:濃度為0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml的槐耳浸膏作用于胃癌細(xì)胞系MKN-28及MKN4524h后，采用RT-PCR及western blot法檢測(cè)Bcl-2、Caspas

2、e-3、 Fas mRNA和蛋白的表達(dá)水平。凝膠成像系統(tǒng)采集處理分析結(jié)果。SPSS17.0處理分析統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果:0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏組與MKN28細(xì)胞作用后，RT-PCR法檢測(cè)Bcl-2 mRNA灰度分析結(jié)果分別為:1.22±0.04、0.65±0.06、0.51±0.05，Caspase-3mRNA灰度分析結(jié)果分別為0.64±0.03、0.73±0.02、1.27±0.04，F(xiàn)as mR

3、NA灰度分析結(jié)果分別為:0.60±0.05、0.74±0.04、1.01±0.04。0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏組與MKN45細(xì)胞作用后，RT-PCR法檢測(cè)Bcl-2 mRNA灰度分析結(jié)果分別為:1.20±0.06、0.83±0.05、0.64±0.05，Caspase-3 mRNA灰度分析結(jié)果分別為0.65±0.01、0.70±0.03、0.99±0.08，F(xiàn)as mRNA灰度分析結(jié)果分別為:0.67±0.06、

4、0.83±0.06、0.90±0.04。 P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml槐耳浸膏組與MKN28細(xì)胞作用后，western blot法檢測(cè)Bcl-2蛋白灰度分析結(jié)果分別為:0.87±0.01、0.67±0.04、0.41±0.05，Caspase-3蛋白灰度分析結(jié)果分別為0.64±0.04、0.80±0.05、0.96±0.04，F(xiàn)as蛋白灰度分析結(jié)果分別為:0.86±0.02、1.0

5、7±0.02、1.13±0.04。0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml濃度槐耳浸膏組與MKN45細(xì)胞作用后，western blot法檢測(cè)Bcl-2蛋白灰度分析結(jié)果分別為:0.93±0.03、0.83±0.05、0.57±0.02，Caspase-3蛋白灰度分析結(jié)果分別為0.76±0.02、0.86±0.05、1.01±0.07，F(xiàn)as蛋白灰度分析結(jié)果分別為:0.67±0.05、0.83±0.05、0.90±0.03。P＜0.05

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:不同濃度槐耳浸膏抑制細(xì)胞Bcl-2 mRNA及蛋白表達(dá)，上調(diào)Caspase-3及FasmRNA及蛋白的表達(dá)，具有劑量依賴(lài)性。在同一槐耳濃度下，高分化腺癌MKN28細(xì)胞與低分化腺癌MKN45細(xì)胞Bcl-2、Caspase-3及Fas mRNA及蛋白表達(dá)水平有差異，MKN28細(xì)胞對(duì)槐耳浸膏誘導(dǎo)凋亡更敏感?；倍嗫赏ㄟ^(guò)Bcl-2、Caspase-3介導(dǎo)的線(xiàn)粒體凋亡信號(hào)通路及Caspase-3、Fas介導(dǎo)死