紫杉醇誘導MKN-45胃癌細胞凋亡及對cyclinE-cyclinD-,1-表達的影響.pdf

1、該研究共分三部分.在第一部分中,我們采用MTT法檢測不同濃度的紫杉醇(0.001、0.01、0.1、1.0 μ mol/L)體外作用MKN-45胃癌細胞不同時間(24、48、72、96小時)的生長抑制率;再以0.1μmol/L紫杉醇作用12h、24h,用Annexin-V-FITC標記,流式細胞儀檢測細胞凋亡率.并用光鏡觀察0.1μmol/L紫杉醇作用48 h細胞形態(tài).結果發(fā)現(xiàn):光鏡下,加入0.1μmol/L泰素24 h后,少數(shù)細胞體積

2、變小變形,胞膜仍完整,染色質濃縮并聚集于核膜下;48 h部分細胞失去附壁能力,脫落至培養(yǎng)液中.以上形態(tài)改變表明,MKN-45在紫杉醇誘導下出現(xiàn)了細胞凋亡.另有部分腫脹細胞,胞膜已破碎,細胞器崩潰,染色質疏松為壞死細胞.不同濃度的紫杉醇作用24,48,72,96小時后,對腫瘤細胞抑制作用結果表明:(1)隨著紫杉醇劑量的增加,細胞的抑制率升高,具有明顯的劑量依賴性.(2)同一劑量藥物對腫瘤細胞的抑制率具有時間依賴性.流式細胞儀檢測顯示:0.

3、1 μmol/L紫杉醇作用12h凋亡率為13.44％、作用24h凋亡率為15.89％,兩組間無統(tǒng)計學差異,但與對照組0.67％有顯著意義(P<0.05);0.01μ mol/L紫杉醇作用24h凋亡率為15.84％與0.1μmol/L組作用24h間無顯著差異.因此,我們得出結論:紫杉醇對MKN-45胃癌細胞生長有明顯的抑制作用;泰素可誘導胃癌細胞凋亡,但在一定范圍內與藥物劑量及作用時間無明顯相關性.第二部分,我們用0.1μmol/L泰素作

4、用MKN-45胃癌細胞12h、24h,應用流式細胞儀對細胞周期進行檢測結果發(fā)現(xiàn):紫杉醇使細胞滯留于G<,2>/M期,隨著對細胞作用時間的延長,G<,2>/M期細胞占細胞總體比率逐漸上升.作用MKN-45胃癌細胞12小時G<,2>/M期細胞比例為30.15％;作用24小時G<,2>/M期細胞比例為49.14％,24小時組與對照組(25.96％)有顯著差異(P<0.05).第三部分,用0.1μmol/L紫杉醇作用MKN-45胃癌細胞24h,