X線反復(fù)照射人食管鱗癌細(xì)胞系KYSE-150的生物效應(yīng)研究.pdf

1、目的:建立人食管鱗癌放射抗拒性細(xì)胞系，并檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，以期了解腫瘤干細(xì)胞與放射抗拒性形成之間t的關(guān)系。
　　 方法:分次照射建立人食管鱗癌放射抗拒性細(xì)胞系KYSE-150R，在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)差異，用G顯帶法進(jìn)行染色體分析。用成克隆實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證KYSE-150和KYSE-150R細(xì)胞的放射敏感性差異，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)它們的細(xì)胞周期分布，Western Blotting法檢測(cè)它們中腫瘤干細(xì)胞(CSC)標(biāo)志物β-c

2、atenin和Integrin-β1的表達(dá)。
　　 結(jié)果:KYSE-150R細(xì)胞的群體倍增時(shí)間長(zhǎng)于親代細(xì)胞KYSE-150[(25．90±0．55)h：(23．62±0．23)h，t=6．62，P=0．00]。KYSE-150R細(xì)胞的染色體數(shù)目增加，并觀察到染色體畸變。KYSE-150R細(xì)胞SF2、D0、Dq及N值均高于KYSE-150細(xì)胞，D0值比為1．21。流式細(xì)胞儀分析顯示KYSE-150細(xì)胞照射后S期比例增加(45．35

3、％±4．03％：55．09％±1．70％，t=-3．86，P=0．02)，G2+M期比例下降(9．91％±3．83％:1．15％±0．32％，t=3．95，P=0．02)，而KYSE-150R則變化不大。Western Blotting結(jié)果顯示KYSE-150R中的β-catenin和Integrin-β1的表達(dá)量約為KYSE-150細(xì)胞的2倍。
　　 結(jié)論:新細(xì)胞系KYSE-150R比其親本更具放射抗拒性，其含有的CSC比例也