姜黃素類似物的設(shè)計、抗炎篩選和安全性研究.pdf

1、目的：
　　 1.姜黃素結(jié)構(gòu)中的β-二酮部分的高反應(yīng)性引起姜黃素的不穩(wěn)定性和代謝缺陷,因此,我們設(shè)計不含β-二酮基的單羰基姜黃素類似物,以提高其穩(wěn)定性、藥理活性及其在體內(nèi)的半衰期。
　　 2.設(shè)計合成的含不同取代基的單羰基姜黃素類似物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)作用,探討其體內(nèi)的穩(wěn)定性和代謝情況。
　　 3.設(shè)計合成的含不同取代基的單羰基姜黃素類似物的抗炎藥理活性,及對動物的毒性作用,與姜黃素作比較,探討其藥理活性及安

2、全性。
　　 方法：
　　 1.姜黃素的結(jié)構(gòu)中含有β-二酮基團(圖1)。相關(guān)報道顯示,姜黃素的不穩(wěn)定性和代謝缺陷主要是由于其結(jié)構(gòu)中的β-二酮部分的高反應(yīng)性而引起的,因此,我們?nèi)サ籀?二酮基團,設(shè)計不含有β-二酮基團的單羰基類似物。去掉β-二酮基團可以有兩種方法:一是在姜黃素結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上還原酮羰基,二是重新化學(xué)合成不含β-二酮基團的單羰基化合物。而結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)酮羰基被還原后其生物活性卻進一步降低。所以我采用第二種方法設(shè)計并重新

3、化學(xué)合成不含β-二酮基團的單羰基化合物(圖2)。
　　 2.穩(wěn)定性
　　 體內(nèi)藥代動力學(xué):健康SD雄性大鼠8只,隨機分成2組,每組4只,分別給予相同劑量的姜黃素(Curcumin)、A50化合物,在不同的時間點眼眶靜脈叢采血,分離血漿,有機溶劑提取,用高效液相色譜法測定血漿中藥物含量,DAS藥動學(xué)軟件計算主要藥動學(xué)參數(shù)。
　　 3.藥理活性
　　 抗炎活性:將受測化合物用二甲基亞砜(DMSO)配制成濃度濃

4、度為10mM的溶液,DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW246.7。主要采用ELISA方法測量各個化合物對LPS刺激巨噬細(xì)胞所釋放的炎癥因子TNF-α、IL-6的作用。并對活性較好的化合物C12,B75,及A50以1,2.5,5,10,20mM為濃度做量效關(guān)系研究。
　　 4.對小鼠的短期毒性:健康的ICR小鼠48只,隨機分成6組,8只/組,分別每天定時灌胃給不同劑量的B19,B63化合物,持續(xù)14天,給藥期間觀察各組鼠的體重變

5、化,第15天處死,取血,取組織,全血分析儀分析血樣,并稱量各組織的重量。
　　 結(jié)果：
　　 1.設(shè)計了環(huán)戊酮(A)、丙酮(B)和環(huán)己酮(C)三個系列的含有不同取代基的單羰基姜黃素類似物。
　　 2.體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)數(shù)據(jù)顯示給藥后,A50血藥濃度峰值(0.434μg/ml),比姜黃素(0.28μg/ml)要高,且姜黃素的AUC0-t僅為0.628mg·h/L,總AUC0-∞也僅為0.74mg·h/L,而A50的

6、相應(yīng)值為1.997和4.606 mg·h/L,A50的半衰期也延長。
　　 3.在藥理活性方面,部分化合物表現(xiàn)出比姜黃素更強的抗炎活性,A50,NA1,B75,B82和C12對TNF-α、IL-6都表現(xiàn)出很好的抑制活性,特別是A50,C12抑制TNF-α、IL-6的作用顯著強于姜黃素,另外A50,NA1,B68,B69,B72,B75,B82,C72,C12,NC3化合物表現(xiàn)出比姜黃素好的抑制TNF-α的作用,A50,NA1,B

7、82和C12則在抑制IL-6的作用上表現(xiàn)出比姜黃素好的活性。C12,B75及A50對炎癥因子TNF-α、IL-6的作用都具有較高的劑量依賴性,劑量越高抑制作用越明顯。
　　 4.毒性方面,服用兩種藥物的小鼠的體重與正常組比無明顯差異,心、肝、肺、腎等組織的重量也無明顯差異,心、肝無明顯損傷,血液的各生化指標(biāo)也無明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.設(shè)計了一系列不含β-二酮基團的單羰基姜黃素類似物
　　 2.