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文檔簡介
1、目的:通過建立乳鼠心房肌細(xì)胞靜態(tài)牽張刺激模型,觀察牽張刺激導(dǎo)致心房負(fù)荷增加時(shí)心房肌細(xì)胞離子通道的重構(gòu),并給予替米沙坦干預(yù),旨在探究心房負(fù)荷增加對心房肌細(xì)胞離子通道的影響,以及替米沙坦對其的抑制作用。
方法:1-3天齡大鼠乳鼠,消化分離心房肌細(xì)胞,培養(yǎng)24 h后分組干預(yù):①對照組;②牽張組:將心房肌細(xì)胞所貼附的硅膠膜面積增加16%,持續(xù)培養(yǎng)24 h;③替米沙坦組:先用含有替米沙坦1μmol/L的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞1 h,將心房肌細(xì)胞
2、所貼附的硅膠膜面積增加16%,繼續(xù)用含有替米沙坦1μmol/L的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞24 h。定量分析三組心房肌細(xì)胞蛋白/DNA比值,適時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測三組心房肌細(xì)胞Cav1.2、Kv4.3、Kv1.5、Mink、Kv7.1和Kv11.1mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:①牽張組心房肌細(xì)胞蛋白/DNA比值與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);②牽張組心房肌細(xì)胞蛋白/DNA比值與替米沙坦組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);
3、③牽張組心房肌細(xì)胞Mink、Kv1.5、Cav1.2、Kv4.3、Kv7.1和Kv11.1 mRNA的表達(dá)與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05或p<0.01);④替米沙坦組心房肌細(xì)胞Mink、Kv1.5、Cav1.2、Kv4.3、Kv7.1和Kv11.1 mRNA的表達(dá)與牽張刺激組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05或p<0.01)。
結(jié)論:①靜態(tài)牽張刺激可導(dǎo)致心房肌細(xì)胞肥大;②替米沙坦可抑制牽張刺激所致的心房肌細(xì)胞肥大;
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