2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:慢性髓性白血病(CML)是造血干細(xì)胞惡性克隆的增殖性疾病,它的典型遺傳學(xué)特征為費城染色體[t(9;22)(q34;q11)]及BCR/ABL融合基因的形成。BCR/ABL融合蛋白具有持續(xù)性酪氨酸激酶的活性,是CML發(fā)病的關(guān)鍵因素。格列衛(wèi)是目前公認(rèn)的比較理想的靶向治療CML的小分子藥物,但由于對格列衛(wèi)產(chǎn)生的耐藥,嚴(yán)重影響了CML的治療效果,因此目前急需解決格列衛(wèi)耐藥的問題。盡管格列衛(wèi)耐藥主要是由BCR/ABL所引起,但有研究表明它與

2、膜轉(zhuǎn)運蛋白也有密切關(guān)系,乳腺癌耐藥蛋白(BCRP/ABCG2)是ABC家族新發(fā)現(xiàn)的成員,有研究提示可能與格列衛(wèi)耐藥有關(guān)。在ABCG2的啟動子區(qū)域含有大量的CpG島,推測ABCG2的表達(dá)很可能受到甲基化的調(diào)控。目前關(guān)于ABCG2基因表達(dá)與甲基化調(diào)控的研究較少,尤其在慢性髓性白血病中的研究不多。本研究立足于慢性髓性白血病細(xì)胞株K562及對格列衛(wèi)耐藥的慢性髓性白血病細(xì)胞株K562/Glv,在體外水平研究ABCG2在基因及蛋白水平的表達(dá)與啟動子

3、區(qū)甲基化的關(guān)系,為格列衛(wèi)耐藥尋求新的思路,從而提高患者的治療效果。
   方法:⑴常規(guī)培養(yǎng)K562及K562/Glv細(xì)胞,用SYBR Green Real-TimePCR及流式細(xì)胞學(xué)分別檢測兩種細(xì)胞中ABCG2 mRNA及蛋白的表達(dá),用MSP檢測ABCG2啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài)。⑵將兩種細(xì)胞培養(yǎng)在10μmol/1的5-氮雜胞苷中,72小時后,用SYBRGreen Real-Time PCR及流式細(xì)胞學(xué)分別檢測兩種細(xì)胞中ABCG2

4、mRNA及蛋白的表達(dá),用MSP檢測ABCG2啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài)。
   結(jié)果:①ABCG2 mRNA在K562/Glv細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于K562細(xì)胞(P<0.01);ABCG2蛋白低表達(dá)于K562[(1.953±0.252)%]及K562/Glv[(1.383±0.259)%]細(xì)胞;ABCG2啟動子區(qū)在K562及K562/Glv細(xì)胞中均呈完全甲基化狀態(tài)。②在5-氮雜胞苷處理后,在K562細(xì)胞中ABCG2啟動子區(qū)呈完全非甲基化

5、狀態(tài),且ABCG2 mRNA及蛋白表達(dá)較前均明顯增高(P<0.01)。③在5-氮雜胞苷處理后,在K562/Glv細(xì)胞中ABCG2啟動子區(qū)呈部分非甲基化,且ABCG2 mRNA及蛋白表達(dá)較前有所升高,但前后相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。④在5-氮雜胞苷處理后,K562細(xì)胞ABCG2啟動子區(qū)甲基化水平低于K562/Glv細(xì)胞(P<0.05),且K562細(xì)胞中ABCG2 mRNA及蛋白表達(dá)均高于K562/Glv細(xì)胞(P<0.05)。

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