高壓氧對(duì)成年大鼠MCAO術(shù)后行為學(xué)及NSCs增殖與分化的影響.pdf

1、目的:
　　探討不同療程高壓氧(hyperbaric oxygen,HBO)對(duì)成年大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后行為學(xué)及其對(duì)患側(cè)海馬組織中神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的影響,為HBO治療缺血性中風(fēng)患者提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.動(dòng)物分組與處理:健康雄性清潔級(jí)SpragueDawley大鼠(華中科技大學(xué)同濟(jì)

2、醫(yī)學(xué)院動(dòng)物房提供)72只,體重250±20g,隨機(jī)分為4組:1,高壓空氣(hyperbaric air,HBA)組;2,常壓氧(normobaric oxygen,NBO)組;3,HBO組;4,空白對(duì)照(control,CON)組。各組根據(jù)治療時(shí)間分為4個(gè)亞組,即2d、3d、7d、14d組。采用線栓法制作MCAO模型,除CON組其余3組均于阻塞血管后2小時(shí)開始相應(yīng)治療,治療后常規(guī)護(hù)理,每天記錄生命體征及體重變化。
　　2.行為學(xué)評(píng)

3、分:大鼠手術(shù)清醒后行相關(guān)治療前進(jìn)行一次行為學(xué)評(píng)分,治療療程結(jié)束后再次進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分后即刻處死并留取患側(cè)海馬標(biāo)本。CON組不做任何治療,與其余各組同一時(shí)間進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分并留取海馬標(biāo)本,計(jì)算前后兩次行為學(xué)評(píng)分差值作為比較對(duì)象。
　　3.western-blot:檢測(cè)各組患側(cè)海馬組織中Nestin,MAP-2,GFAP蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　一、體重變化及行為學(xué)測(cè)試
　　1.各組手術(shù)后平均體重均下降,HBO治療

4、的大鼠體重恢復(fù)較快,HBO組大鼠治療7d后體重均高于其他組,14d治療結(jié)束后超過其手術(shù)前自身體重,其余各組體重增長(zhǎng)緩慢,均未達(dá)到手術(shù)前水平。
　　2.HBO組行為學(xué)評(píng)分前后差值在7d,14d組較其他組高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。
　　二、分子學(xué)變化
　　1.Western-blot結(jié)果顯示給予3種治療后各組大鼠患側(cè)海馬nestin蛋白均較CON組升高,治療后7d,14dHBO組nestin值較其他組升高,第

5、14d升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);
　　2.MAP-2檢測(cè)數(shù)值顯示治療后7d,14dHBO組均較其他組高,第7d組HBO較其他組差異有顯著意義(p<0.05);
　　3.GFAP在各組均有升高但趨勢(shì)不明顯,HBA組含量最高但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05);
　　結(jié)論:
　　HBO能促進(jìn)MCAO術(shù)后大鼠一般情況的恢復(fù)。HBO能夠持續(xù)性增加大鼠MCAO術(shù)后患側(cè)海馬NSCs的增殖,并促進(jìn)其向神經(jīng)元分化