基于酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測(cè)急性早幼細(xì)粒細(xì)胞白血病mRNA的多通道生物傳芯片的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文基于酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測(cè)急性早幼細(xì)粒細(xì)胞白血病mRNA的多通道生物傳芯片的實(shí)驗(yàn)研究姓名：陳婧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥學(xué)（藥物分析）指導(dǎo)教師：林新華20100301福建醫(yī)科大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文PML／RARamRNA的檢測(cè)，同時(shí)考察了傳感芯片的特異性、穩(wěn)定性等性能。首先，根據(jù)急性早幼粒細(xì)胞白血病融合基因的堿基序列設(shè)計(jì)出“三明治“結(jié)構(gòu)DNA探針。將電化學(xué)技術(shù)和酶聯(lián)免疫分析技術(shù)相結(jié)合構(gòu)建出的“三明治”結(jié)構(gòu)的多通道電化學(xué)

2、傳感芯片可以識(shí)別和定量檢測(cè)溶液中人工合成的PML／RARa融合基因片斷。結(jié)果表明，在最佳條件下，測(cè)定mRNA的線性范圍為01pM200pM，檢測(cè)限為1210’14M。研究還發(fā)現(xiàn)該傳感器能夠很好地識(shí)別互補(bǔ)鏈與不匹配鏈，具有較好的特異性。可以實(shí)現(xiàn)對(duì)急性早幼粒細(xì)胞白血病中PML／RARa融合基因mRNA定性定量的測(cè)定。另外，根據(jù)急性早幼粒細(xì)胞白血病融合基因的堿基序列設(shè)計(jì)出莖環(huán)結(jié)構(gòu)DNA探針并且采用電化學(xué)酶聯(lián)免疫分析技術(shù)構(gòu)建出發(fā)夾結(jié)構(gòu)探針修飾的

3、多通道電化學(xué)傳感芯片對(duì)人工合成的PML／RARa融合基因片斷進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明：在優(yōu)化雜交條件下，該傳感芯片測(cè)定mRNA的濃度線性范圍為05pM300pM，檢測(cè)限為5010。14M。能很好的識(shí)別雜交溶液中的完全互補(bǔ)序列與單堿基突變序列，甚至能夠很好識(shí)別種類(lèi)的單堿基不匹配序列(A堿基不匹配、G堿基不匹配、C堿基不匹配)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)急性早幼粒細(xì)胞白血病中PML／RARa融合基因定性定量的測(cè)定。關(guān)鍵詞：急性早幼粒細(xì)胞白血??；融合基因；三明治結(jié)