尼莫地平對(duì)耳蝸缺血再灌注損傷保護(hù)作用研究.pdf

1、研究表明諸如突發(fā)性聾、老年性聾、噪聲性聾等與內(nèi)耳微循環(huán)障礙有關(guān)。內(nèi)耳解剖決定了內(nèi)耳供血途徑的脆弱性，易發(fā)生循環(huán)障礙。組織器官缺血再灌注損傷中均發(fā)現(xiàn)有鈣離子內(nèi)流，細(xì)胞鈣超載，后者可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。而對(duì)于毛細(xì)胞及螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，我們并不清楚其缺血再灌注損傷的分子機(jī)制。尼莫地平作為鈣離子拮抗劑，已經(jīng)被證明在心腦等器官缺血再灌注損傷中發(fā)揮良好的保護(hù)作用。本研究旨在探討尼莫地平對(duì)耳蝸缺血再灌注損傷的干預(yù)作用及可能機(jī)制。本研究分為兩個(gè)部分。
　

2、　 第一部分：耳蝸缺血再灌注損傷模型的建立。
　　 目的：探討建立耳蝸缺血再灌注動(dòng)物模型的方法,為下一步實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：選用豚鼠24只，雌雄不拘，把豚鼠分為三組：手術(shù)組、實(shí)驗(yàn)組、正常對(duì)照組。每組8只豚鼠。手術(shù)組經(jīng)顱底暴露小腦前下動(dòng)脈，實(shí)驗(yàn)組使用40[％]的三氯化鐵溶液誘導(dǎo)小腦前下動(dòng)脈形成血栓，并在血栓形成后，給予尿激酶(UK)溶解血栓。正常組不行手術(shù)，作空白對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過(guò)程采用激光多普勒監(jiān)測(cè)耳蝸血流量(COB

3、F),實(shí)驗(yàn)前后測(cè)量豚鼠聽(tīng)性腦干誘發(fā)電位(ABR)值。
　　 結(jié)果：手術(shù)組實(shí)驗(yàn)前后COBF變化不明顯，實(shí)驗(yàn)組予三氯化鐵誘導(dǎo)后30分鐘下降明顯，用UK溶栓后COBF回復(fù)到誘導(dǎo)前的90[％]。手術(shù)組實(shí)驗(yàn)前后ABR無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)后ABRⅢ波反應(yīng)閾均比實(shí)驗(yàn)前有明顯提高，正常組和手術(shù)組實(shí)驗(yàn)前后無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)變化。
　　 結(jié)論：應(yīng)用三氯化鐵誘導(dǎo)小腦前下動(dòng)脈血栓形成，并用尿激酶溶解的方法，可以成功的制備內(nèi)耳缺血再灌注模型。<

4、br>　　 第二部分：L型鈣通道阻滯劑尼莫地平對(duì)豚鼠耳蝸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
　　 目的：觀察L型鈣通道阻滯劑尼莫地平對(duì)豚鼠耳蝸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：選42只豚鼠，雌雄不拘，隨機(jī)分為：a實(shí)驗(yàn)組18只;b尼莫地平干預(yù)組18只；c正常(空白)對(duì)照組6只。實(shí)驗(yàn)組與干預(yù)組按測(cè)ABR以及斷頭取聽(tīng)泡時(shí)間又分為再灌注1h、2h和6h時(shí)間段，每一時(shí)間段6只豚鼠。用Fecl3(三氯化鐵)誘導(dǎo)小腦前

5、下動(dòng)脈缺血后以尿激酶溶栓制備缺血再灌注模型；尼莫地平干預(yù)組在應(yīng)用Fecl3 10分鐘前腹腔注射尼莫地平0.5mg/kg,實(shí)驗(yàn)組在相同條件下注射等量生理鹽水，正常對(duì)照組不予注射任何藥物。實(shí)驗(yàn)組、干預(yù)組分別于再灌注后1h、2h、6h觀察聽(tīng)覺(jué)腦干誘發(fā)電位(ABR),基底膜hoechest33342熒光染色，耳蝸中軸切片免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)螺旋神經(jīng)節(jié)casepase-3表達(dá)。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組、干預(yù)組均出現(xiàn)ABR反應(yīng)閾值較對(duì)照組上升。