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文檔簡介
1、研究表明諸如突發(fā)性聾、老年性聾、噪聲性聾等與內(nèi)耳微循環(huán)障礙有關。內(nèi)耳解剖決定了內(nèi)耳供血途徑的脆弱性,易發(fā)生循環(huán)障礙。組織器官缺血再灌注損傷中均發(fā)現(xiàn)有鈣離子內(nèi)流,細胞鈣超載,后者可導致細胞凋亡。而對于毛細胞及螺旋神經(jīng)節(jié)細胞,我們并不清楚其缺血再灌注損傷的分子機制。尼莫地平作為鈣離子拮抗劑,已經(jīng)被證明在心腦等器官缺血再灌注損傷中發(fā)揮良好的保護作用。本研究旨在探討尼莫地平對耳蝸缺血再灌注損傷的干預作用及可能機制。本研究分為兩個部分。
2、 第一部分:耳蝸缺血再灌注損傷模型的建立。
目的:探討建立耳蝸缺血再灌注動物模型的方法,為下一步實驗奠定基礎。
方法:選用豚鼠24只,雌雄不拘,把豚鼠分為三組:手術組、實驗組、正常對照組。每組8只豚鼠。手術組經(jīng)顱底暴露小腦前下動脈,實驗組使用40[%]的三氯化鐵溶液誘導小腦前下動脈形成血栓,并在血栓形成后,給予尿激酶(UK)溶解血栓。正常組不行手術,作空白對照。實驗過程采用激光多普勒監(jiān)測耳蝸血流量(COB
3、F),實驗前后測量豚鼠聽性腦干誘發(fā)電位(ABR)值。
結果:手術組實驗前后COBF變化不明顯,實驗組予三氯化鐵誘導后30分鐘下降明顯,用UK溶栓后COBF回復到誘導前的90[%]。手術組實驗前后ABR無明顯統(tǒng)計學變化。實驗組實驗后ABRⅢ波反應閾均比實驗前有明顯提高,正常組和手術組實驗前后無明顯統(tǒng)計學變化。
結論:應用三氯化鐵誘導小腦前下動脈血栓形成,并用尿激酶溶解的方法,可以成功的制備內(nèi)耳缺血再灌注模型。<
4、br> 第二部分:L型鈣通道阻滯劑尼莫地平對豚鼠耳蝸缺血再灌注損傷的保護作用。
目的:觀察L型鈣通道阻滯劑尼莫地平對豚鼠耳蝸缺血再灌注損傷的保護作用并探討其作用機制。
方法:選42只豚鼠,雌雄不拘,隨機分為:a實驗組18只;b尼莫地平干預組18只;c正常(空白)對照組6只。實驗組與干預組按測ABR以及斷頭取聽泡時間又分為再灌注1h、2h和6h時間段,每一時間段6只豚鼠。用Fecl3(三氯化鐵)誘導小腦前
5、下動脈缺血后以尿激酶溶栓制備缺血再灌注模型;尼莫地平干預組在應用Fecl3 10分鐘前腹腔注射尼莫地平0.5mg/kg,實驗組在相同條件下注射等量生理鹽水,正常對照組不予注射任何藥物。實驗組、干預組分別于再灌注后1h、2h、6h觀察聽覺腦干誘發(fā)電位(ABR),基底膜hoechest33342熒光染色,耳蝸中軸切片免疫組織化學染色檢測螺旋神經(jīng)節(jié)casepase-3表達。
結果:實驗組、干預組均出現(xiàn)ABR反應閾值較對照組上升。
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