神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中傳入信號(hào)和信號(hào)傳導(dǎo)模式的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、神經(jīng)免疫學(xué)是二十世紀(jì)末期生命科學(xué)領(lǐng)域發(fā)展最為迅速的學(xué)科之一,神經(jīng)免疫學(xué)科的基礎(chǔ)理論“神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)”學(xué)說(shuō)已經(jīng)得到學(xué)術(shù)界的認(rèn)同。在“神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)”研究的基礎(chǔ)上,相關(guān)的實(shí)驗(yàn)證明了神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)間存在功能調(diào)節(jié)作用。在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)信號(hào)傳導(dǎo)的解剖學(xué)構(gòu)筑的研究中,調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的功能相關(guān)的傳入信號(hào)和信號(hào)傳入通路構(gòu)成是領(lǐng)域研究爭(zhēng)論的焦點(diǎn)之一。 本論文在課題組前期不同免疫狀態(tài)大鼠神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)腦區(qū)的定位研究工作

2、的基礎(chǔ)上,應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的表面加強(qiáng)激光解析電離-飛行時(shí)間-質(zhì)譜技術(shù)(SELDI-TOF-MS)和基質(zhì)輔助激光解析電離-飛行時(shí)間-質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOF-MS)及雙向電泳(2-DE)分離技術(shù)等方法對(duì)不同免疫狀態(tài)大鼠的外周血清和腦脊液組份進(jìn)行比對(duì)分析,探索參與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)的上傳信號(hào)及傳入通路構(gòu)成模式,為進(jìn)一步闡明神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的解剖學(xué)構(gòu)筑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 SELDI分析結(jié)果顯示,免疫組動(dòng)物外周血中觀察到221個(gè)有顯著性差

3、異的信號(hào)峰,其中173個(gè)為表達(dá)量高于對(duì)照組的正向表達(dá)峰。實(shí)驗(yàn)各組大鼠腦脊液的分析結(jié)果未見(jiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的特異性差異峰表達(dá);在實(shí)驗(yàn)組血清中檢測(cè)到的特異性差異峰也未在腦脊液中觀察到相對(duì)應(yīng)的同步變化。在76個(gè)最高峰值為免疫2天的免疫功能相關(guān)性差異表達(dá)的免疫大鼠血清的信號(hào)峰中,根據(jù)差異信號(hào)峰的分子量、pI值和來(lái)源細(xì)胞在已知的神經(jīng)介質(zhì)、神經(jīng)肽、激素和細(xì)胞因子等信號(hào)物質(zhì)中進(jìn)行分析篩選,推測(cè)可能成為神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的傳入信號(hào)物質(zhì)。經(jīng)2-DE分離和MEL

4、DI-TOF-MS進(jìn)一步分析和鑒定免疫大鼠血清中18KD特異組份,分析報(bào)告了18種來(lái)源的19個(gè)相關(guān)肽段序列,共247氨基酸,但相關(guān)結(jié)果不能滿(mǎn)足任何已知物質(zhì)的氨基酸序列的排序。 我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明: 1)本論文采用SELDI技術(shù)對(duì)不同免疫狀態(tài)組大鼠和正常對(duì)照組大鼠的血清進(jìn)行對(duì)比分析的結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組表達(dá)了221個(gè)與免疫功能相關(guān)的差異信號(hào)峰;差異信號(hào)表達(dá)峰值的分布在免疫2天的有76個(gè),免疫4天有1個(gè),免疫6天有96個(gè);差異峰值

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析具有極顯著性差異,某些差異峰的特異性甚至表現(xiàn)為“全或無(wú)”的關(guān)系。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持了神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)傳入信號(hào)模式研究中兩個(gè)重要的代表性假說(shuō)--“血行傳導(dǎo)通路”和“神經(jīng)傳導(dǎo)通路”假說(shuō)在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)傳入信號(hào)通路領(lǐng)域研究中達(dá)成的共識(shí),即免疫活性細(xì)胞釋放功能活動(dòng)相關(guān)信號(hào)物質(zhì)到體液(血液)中,進(jìn)而啟動(dòng)神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能。 2)對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組大鼠的腦脊液組份對(duì)比分析的結(jié)果顯示,腦脊液中并不存在與免疫功能變化相關(guān)的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能的傳

6、入信號(hào)物質(zhì),血液中免疫功能相關(guān)的信號(hào)物質(zhì)的變化沒(méi)有在腦脊液中平行反映。神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)信號(hào)傳入模式不是“血液-腦脊液-接觸腦脊液的神經(jīng)元系統(tǒng)-中樞腦區(qū)”的血行傳導(dǎo)方式。本論文神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)信號(hào)傳導(dǎo)模式研究結(jié)果不支持“血行傳導(dǎo)通路”假說(shuō)。 3)根據(jù)最高峰值在免疫2天的免疫功能相關(guān)的差異信號(hào)峰的分子量、PI值和來(lái)源細(xì)胞,在已知的神經(jīng)介質(zhì)、神經(jīng)肽、激素和細(xì)胞因子等信號(hào)物質(zhì)中進(jìn)行比對(duì)篩選,推測(cè)細(xì)胞因子IL-8、IL-15和IL-1

7、8等三個(gè)組份可能成為免疫系統(tǒng)釋放的跨系統(tǒng)傳遞的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)的傳入信號(hào)物質(zhì)。 4)本論文應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法2-DE-MALDI-TOF-MS技術(shù)分析免疫大鼠血清中IL-1分子在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)傳入通路中的地位和作用,發(fā)現(xiàn)免疫活性細(xì)胞釋放到血液中的IL-1不可能成為免疫系統(tǒng)釋放的跨系統(tǒng)傳遞的信號(hào)物質(zhì),參與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)功能,否定了“血行傳導(dǎo)通路”和“神經(jīng)傳導(dǎo)通路”假說(shuō)在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)傳入信號(hào)通路領(lǐng)域研究中關(guān)

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