N-花生四烯酸氨基乙醇對小鼠肝突觸小體攝取及肝片釋放去甲腎上腺素的影響.pdf

1、目的：
　　 1. 觀察突觸蛋白Synapsin在小鼠肝突觸小體與肝組織中的表達差異。
　　 2. 觀察不同濃度AEA對小鼠肝片釋放NE的影響。
　　 3. 觀察不同濃度AEA對小鼠離體肝突觸小體攝取NE的影響。
　　 方法：
　　 第一部分：利用密度梯度離心法制備小鼠肝突觸小體；采用Western-Blot 方法分別檢測肝突觸小體與肝組織中突觸蛋白Synapsin的表達。
　　 第二部分

2、：高效液相色譜－電化學方法檢測不同濃度AEA對肝片自發(fā)性和去極化時NE 釋放的影響。
　　 第三部分：高效液相色譜－電化學方法檢測不同濃度AEA對小鼠離體肝突觸小體攝取NE的影響。
　　 結(jié)果：
　　 第一部分：電鏡下可見離體肝突觸小體: 由完整質(zhì)膜包圍,其內(nèi)含有囊泡及神經(jīng)原纖維,并可見到類似突觸后膜的結(jié)構(gòu)。部分突觸小體出現(xiàn)空泡。突觸小體含量較高,?？梢姷接坞x的線粒體、微粒體及細胞突起的碎片；突觸蛋白Synaps

3、in在肝組織中的表達明顯比突觸小體中高。
　　 第二部分：隨著 AEA 濃度的增加(1-20 μmol/L)，AEA對肝片 NE 含鈣自發(fā)性釋放的抑制率(與對照組比較)逐漸下降并顯現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系;而對無鈣自發(fā)性釋放抑制率先降低后升高,最低為11.43％。對肝片NE 含鈣去極化釋放的抑制率先升高后降低,最高為39.17％。當AEA 濃度達到20 μmol/L時,對肝片NE的作用表現(xiàn)為刺激而不是抑制；對無鈣去極化釋放抑制率先升高后

4、降低,最高為85.29％。
　　 第三部分：隨著AEA 濃度從1 μmol/L 逐漸升高至10 μmol/L，肝突觸小體內(nèi)NE的含量減少27.81～70.79％，存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)；AEA 濃度繼續(xù)升高40 μmol/L時,NE 含量不再繼續(xù)減少。
　　 結(jié)論：
　　 1. 突觸前膜特異性蛋白Synapsin在密度梯度離心法提取的突觸小體中的表達只占肝組織中的一部分。