基于中藥血清藥理學(xué)的黃藥子及配伍當(dāng)歸后減毒增效性研究.pdf

1、近年來(lái),在臨床上黃藥子多用于治療甲狀腺腫和各型癌癥等癥,尤其在治療抗癌方面尤顯突出,但在臨床用藥過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)黃藥子具有一定的毒性反應(yīng),其毒性可引起肝、腎的損傷。據(jù)有關(guān)報(bào)道,肝、腎損傷的程度與給藥劑量和時(shí)間有關(guān),對(duì)肝臟的損傷在短時(shí)間內(nèi)即可表現(xiàn)出來(lái),對(duì)腎臟的損傷在長(zhǎng)期使用后才能顯現(xiàn)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,因服用黃藥子引起的藥源性肝炎已達(dá)50余例,其中3例死亡。但有研究表明當(dāng)歸配伍黃藥子后,可明顯減輕單用黃藥子對(duì)肝細(xì)胞的損害程度,并且對(duì)腎臟的損害也有一

2、定的緩解作用。因此,本研究應(yīng)用中藥血清藥理學(xué)方法進(jìn)一步探討黃藥子肝毒性及配伍后的減毒作用機(jī)理,其對(duì)臨床合理、安全用藥具有重要的指導(dǎo)意義。 中藥血清藥理學(xué)是一種適合中藥特點(diǎn)的進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種新的藥理方法學(xué),它排除了傳統(tǒng)中藥體外實(shí)驗(yàn)中中藥本身的理化性質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,又能反映藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程及其作用結(jié)果。本研究是在已有研究成果基礎(chǔ)上,利用中藥血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法對(duì)黃藥子及其配伍當(dāng)歸的抗腫瘤作用和肝毒性進(jìn)行深入研究,并通過(guò)H

3、PLC、MTT實(shí)驗(yàn)、P-糖蛋白(P-gp)、細(xì)胞毒性檢測(cè)及生化指標(biāo)的檢測(cè)等技術(shù)進(jìn)一步探討黃藥子的毒效和當(dāng)歸對(duì)黃藥子毒性的影響及其減毒機(jī)制。具體結(jié)果如下： 1.用HPLC分析法確定黃藥子及配伍當(dāng)歸含藥血清的最佳采血時(shí)間,結(jié)果表明黃藥子及配伍當(dāng)歸的含藥血清在30min時(shí)達(dá)到最高峰,但代謝較快,60-180min時(shí)里穩(wěn)定狀態(tài),入血成分多,峰值高,最后確定給藥后60min為含藥血清最佳采血時(shí)間。 2.應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)觀察黃藥子及配

4、伍當(dāng)歸的含藥血清對(duì)肉瘤細(xì)胞(S180)和肝癌細(xì)胞(H22)增殖的抑制作用。結(jié)果顯示黃藥子及配伍當(dāng)歸的含藥血清在48h時(shí)抑瘤效果最好,其抑制率分別為37.18％、11.90％及45.56％、21.54％,說(shuō)明黃藥子配伍當(dāng)歸起到了增效的作用,當(dāng)歸可能通過(guò)某種環(huán)節(jié)增強(qiáng)了黃藥子的抑瘤效果。 3.黃藥子及配伍當(dāng)歸含藥血清在H22、S180中對(duì)P-gP表達(dá)的影響變化。研究結(jié)果表明,細(xì)胞內(nèi)蓄積的Rho-123的熒光強(qiáng)度在0.5h到1h吸收最快

5、,空白血清組在1h達(dá)到最大吸收后無(wú)明顯變化,黃藥子組在2h后熒光強(qiáng)度明顯低于空白血清組,配伍組在達(dá)到最大吸收的1h后明顯大于黃藥子組,使黃藥子組引起升高的P-gP表達(dá)降低。由此闡明黃藥子配伍當(dāng)歸后可通過(guò)降低P-gP表達(dá)增強(qiáng)黃藥子的抗腫瘤療效,是其拮抗黃藥子毒性的作用機(jī)制之一。 4.觀察分析黃藥子及配伍當(dāng)歸含藥血清對(duì)體外肝細(xì)胞的存活率和GPT、GOT、LDH的酶活性影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃藥子使正常大鼠肝細(xì)胞存活率明顯下降與空白組顯著

6、性差異(P<0.05),而配伍組細(xì)胞的存活率明顯提高與空白組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。黃藥子對(duì)肝細(xì)胞有損傷作用,可引起胞內(nèi)GOT、GPT、LDH泄漏,培養(yǎng)上清液中GOT、GPT、LDH活性與空白組比明顯升高(P<0.01),GOT和GPT為肝細(xì)胞受損的特征性酶譜,LDH活性的升高提示細(xì)胞膜完整性受損,說(shuō)明黃藥子具有潛在肝毒性。配伍組LDH、GOT、GPT的活性受到抑制,與空白組無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明當(dāng)歸對(duì)肝細(xì)胞有一定的保