DNA甲基化在ITP發(fā)病機制中的初步研究.pdf

1、目的：DNA甲基化與疾病的關(guān)系已逐漸成為生物醫(yī)學(xué)研究的新熱點之一。近年來的研究顯示許多自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)等都檢測到基因組DNA的低甲基化，且這種低甲基化在疾病的發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用。特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)是一種以血小板破壞加速為主的器官特異性自身免疫性疾病，具體發(fā)病機制未完全清楚。為了明確DNA甲基化異常在ITP發(fā)病中的作用機制，我們對ITP中兩種甲基化CpG結(jié)合域蛋白(M

2、BD)與DNA的甲基化進(jìn)行了相關(guān)性研究。 方法：運用甲基化芯片篩選ITP中甲基化異常變化的基因；ELISA檢測16例ITP患者和10例正常對照的CD4+T細(xì)胞脫氧甲基胞嘧啶(dmC)的濃度。用SYBR Green實時定量PCR方法測定45例ITP患者與20例正常對照外周血單個核細(xì)胞及10例ITP患者及9例正常對照的CD4+及CD4-細(xì)胞MBD2和MBD4mRNA的相對表達(dá)水平，探討DNA甲基化水平與MBD2和MBD4兩種酶之間的

3、相關(guān)性，并分析其與臨床參數(shù)之間是否存在相關(guān)性。 結(jié)果：ITP患者的CD4+和CD4-細(xì)胞的甲基化水平(0.6640，0.4432-0.9691)，(0.4562，0.0900-0.9096))均低于正常對照(0.9012，0.8019-1.1148)，(0.8252，0.4579-1.0169)，并具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義差異(P值分別為0.0001，0.0029)；ITP患者外周血單個核細(xì)胞中MBD2和MBD4的mRNA表達(dá)均低于

4、對照組，且亦有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.0001)。在ITP患者的CD4+和CD4-細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)兩種酶的低表達(dá)。有趣的是在正常對照中兩種酶的mRNA表達(dá)與DNA甲基化水平呈正相關(guān)(MBD2與MBD4的r2分別為0.7181，0.6084，P值分別為0.0039，0.015)，在ITP患者中兩種酶的mRNA表達(dá)水平卻與DNA的甲基化水平呈負(fù)相關(guān)(其r2分別為0.6038，0.4975，P值分別為0.0082，0.027)。 結(jié)論：在IT