樹突狀細(xì)胞疫苗對(duì)人化荷人膀胱癌SCID鼠循環(huán)微轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)歸的影響.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文樹突狀細(xì)胞疫苗對(duì)人化荷人膀胱癌SCID鼠循環(huán)微轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)歸的影響姓名：王斌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：米振國史天良20060515山西醫(yī)科大學(xué)磺士學(xué)位論文第二部分人化荷人膀胱癌SCID鼠自發(fā)轉(zhuǎn)移模型的建立目的：建立人化荷人膀胱癌SCID鼠模型并觀察其自發(fā)出現(xiàn)循環(huán)微轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移情況。方法：將人膀胱癌細(xì)胞株T24體外侵襲篩選出高轉(zhuǎn)移亞群T24，并常規(guī)培養(yǎng)；選取30只雌性SCID鼠，隨機(jī)分為人化荷瘤組24只和

2、對(duì)照組6只，其中人化荷瘤組又分為膀胱原位模型組和皮下異位模型組各12只，對(duì)照組又分出空白對(duì)照3只；人外周血淋巴細(xì)胞4x107個(gè)／鼠腹腔轉(zhuǎn)輸進(jìn)行免疫重建，人化后ld行腫瘤細(xì)胞種植，原位模型組采用酸預(yù)處理膀胱粘膜經(jīng)尿道灌注3x106個(gè)T24，細(xì)胞，同樣劑量細(xì)胞注射接種于異位模型組鼠右后肢內(nèi)側(cè)皮下。通過成瘤性試驗(yàn)及鼠外周血中細(xì)胞角蛋白20mRNARTPCR檢測判定腫瘤模型及自發(fā)循環(huán)微轉(zhuǎn)移的發(fā)生；通過流式檢測鼠體內(nèi)人IgG和CD3、CD4、CD

3、8T細(xì)胞表達(dá)水平及脾重反映人化成功。結(jié)果：膀胱原位模型組64％成瘤，皮下異位模型組100％成瘤，腫瘤組織病理類型為移行細(xì)胞癌；不同周次時(shí)間段兩組鼠外周血中人細(xì)胞角蛋白20mRNA的表達(dá)不一，部分鼠血中表達(dá)細(xì)胞角蛋白20mRNA，至6w分別為5／11例和4／12例表達(dá)，而對(duì)照組無一表達(dá)；不同周次時(shí)間段鼠血中人IgG均一定水平存在，2w即可檢出，其水平并隨人化時(shí)間延長而逐漸升高，5w人IgG水平較前有所下降，與空白對(duì)照組問差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

4、F=9696，P=0001)；人CD3、CD4、CD8T細(xì)胞在鼠血及脾中不同的周次時(shí)間段均有表達(dá)，而空白對(duì)照組均未檢出，差異均有顯著意義(Po05)；6w實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)時(shí)鼠脾重平均(1897士562)rag，較空白對(duì)照組(388士159)mg問差異有顯著意義，P=0002。結(jié)論：用經(jīng)過侵襲篩選的高轉(zhuǎn)移亞群T24一，細(xì)胞，行原位和異位種植可以成功制各荷瘤SCID鼠模型，并實(shí)現(xiàn)自發(fā)性轉(zhuǎn)移；人外周血淋巴細(xì)胞腹腔轉(zhuǎn)輸SCID鼠，可以成功人化SCID鼠