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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:(1)觀察重組口服福氏宋內(nèi)氏痢疾雙價(jià)活疫苗免疫后的不良反應(yīng),為痢疾疫苗的推廣應(yīng)用提供依據(jù)。(2)研究受試者糞便中疫苗株的檢出情況,為疫苗免疫效果提供依據(jù)。(3)對(duì)分離到的志賀菌進(jìn)行毒力檢測(cè),評(píng)價(jià)疫苗株毒力變化情況。(4)對(duì)分離到的志賀菌進(jìn)行同源性分析,探討其與疫苗株和江蘇省徐州地區(qū)野生株的同源性關(guān)系。 方法:(1)選擇江蘇省徐州市豐縣地區(qū),抽取80人口服禍?zhǔn)纤蝺?nèi)氏痢疾雙價(jià)活疫苗,觀察免疫后的各種不良反應(yīng)。(2)采集受試者糞
2、便標(biāo)本或肛拭子,分離培養(yǎng),觀察、挑選可疑菌落進(jìn)行生化鑒定(API20E板條)和血清試探性玻片凝集試驗(yàn),挑選與疫苗株表型一致的志賀菌。(3)PCR方法檢測(cè)毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD,同時(shí)進(jìn)行豚鼠角結(jié)膜試驗(yàn)對(duì)分離到的菌株進(jìn)行毒力檢測(cè)。(4)進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測(cè)疫苗株FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷,脈沖場(chǎng)凝膠電泳方法對(duì)分離的菌株進(jìn)行同源性分析。 結(jié)果:(1)80名受試者中總不良反應(yīng)率為70.00%,其中全身不良反
3、應(yīng)發(fā)生率為3.75%,局部不良反應(yīng)發(fā)生率為66.25%,各種不良反應(yīng)中主要以腹痛和嘔吐為主。(2)試驗(yàn)期間收集糞便標(biāo)本或肛拭子共計(jì)1118份。分離培養(yǎng)、挑選可疑菌落穿刺克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,挑選得到滿足分解葡萄糖,不分解乳糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的菌株共計(jì)347株。穿刺細(xì)菌微量生化管(尿素和蛋白胨水),保留尿素和蛋白胨水均為陰性的菌株共計(jì)121株。用API20E板條(bioMerieuex)對(duì)其進(jìn)行生化鑒定,屬于志賀菌屬的共10株。(3)10株志賀菌
4、的四個(gè)毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,其中兩株菌四種毒力基因的檢測(cè)均為陰性,其余菌株四種毒力基因的檢測(cè)則呈陽(yáng)性,豚鼠角結(jié)膜試驗(yàn)結(jié)果與PCR檢測(cè)結(jié)果一致。(4)對(duì)分離到的菌株進(jìn)行PCR擴(kuò)增未檢測(cè)出疫苗株FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷。脈沖場(chǎng)凝膠電泳檢測(cè)顯示,分離得到的忐賀菌和江蘇省徐州地區(qū)野生株帶型的聚類相似性為85%,屬于同一個(gè)克隆系,而與疫苗株之間的聚類相似性為70%,可以認(rèn)為這些菌株與疫苗株不
5、屬于同一個(gè)克隆系。 結(jié)論:(1)本次研究中重組口服福氏宋內(nèi)氏痢疾雙價(jià)活疫苗的各種不良反應(yīng)發(fā)生率均高于同類研究中關(guān)于不良反應(yīng)的報(bào)道,表明該疫苗的安全性還有待于進(jìn)一步提高。(2)80名受試者為期16天的采樣中共分離的10株志賀菌。毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR檢測(cè)結(jié)果與豚鼠角膜結(jié)膜實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致,其中8株菌有毒力,推測(cè)疫苗株返祖或受試者自然感染。(3)FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷均未在糞便樣本中分離的志賀
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