短鏈脂肪酸鹽丁酸鈉抑制人結(jié)腸癌細胞SW620增殖及其機制的實驗研究.pdf

1、目的：研究短鏈脂肪酸鹽丁酸鈉對體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細胞SW620增殖抑制的影響，并探討其作用機制。
　　 方法：人結(jié)腸癌細胞株SW620用含10％胎牛血清的RPMT1640培養(yǎng)基置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，實驗分為對照組和不同濃度丁酸鈉（1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L）處理組，加藥物后培養(yǎng)24，48，72小時。MTT比色法測定丁酸鈉對SW620細胞生長和抑制率的變化，倒置相差顯

2、微鏡觀察其形態(tài)變化，流式細胞儀檢測細胞周期分布的變化，并采用RT-PCR檢測p21WAF1mRNA和VEGFmRNA的表達變化，Western Blot檢測p21WAF1、VEGF蛋白水平的表達變化。
　　 結(jié)果：1、經(jīng)丁酸鈉處理后，與對照組比較可觀察到SW620細胞形態(tài)發(fā)生明顯改變。2、MTT檢測法顯示，與對照組比較，經(jīng)不同濃度（1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L）丁酸鈉處理后SW

3、620細胞增殖受到抑制，并呈一定的濃度和時間依賴性。3、流式細胞儀檢測顯示，經(jīng)2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L的丁酸鈉處理48小時后，SW620細胞S期比例明顯減少，分別從處理前的28.99％降至14.39％、6.54％、5.04％（p<0.05）；而G0/G1期比例則逐漸增加，分別從處理前的51.11％增至65.71％、78.98％、90.40％（p<0.05）。4、經(jīng)不同濃度的丁酸鈉處理24小時后，p21

4、WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達均明顯上調(diào)，VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表達出現(xiàn)下調(diào)，與對照組比較有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；且隨丁酸鈉作用濃度增加，p21WAF1上調(diào)水平有逐漸增加趨勢，相反，VEGF表達水平呈逐漸下調(diào)趨勢。
　　 結(jié)論：丁酸鈉能有效抑制人結(jié)腸癌細胞SW620的增殖，且呈一定的濃度、時間依賴性，其機制與上調(diào)p21WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達，使細胞周期阻滯在G0/G1期有關(guān)。丁酸鈉亦能下