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文檔簡介
1、目的:研究短鏈脂肪酸鹽丁酸鈉對體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細胞SW620增殖抑制的影響,并探討其作用機制。
方法:人結(jié)腸癌細胞株SW620用含10%胎牛血清的RPMT1640培養(yǎng)基置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),實驗分為對照組和不同濃度丁酸鈉(1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L)處理組,加藥物后培養(yǎng)24,48,72小時。MTT比色法測定丁酸鈉對SW620細胞生長和抑制率的變化,倒置相差顯
2、微鏡觀察其形態(tài)變化,流式細胞儀檢測細胞周期分布的變化,并采用RT-PCR檢測p21WAF1mRNA和VEGFmRNA的表達變化,Western Blot檢測p21WAF1、VEGF蛋白水平的表達變化。
結(jié)果:1、經(jīng)丁酸鈉處理后,與對照組比較可觀察到SW620細胞形態(tài)發(fā)生明顯改變。2、MTT檢測法顯示,與對照組比較,經(jīng)不同濃度(1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L)丁酸鈉處理后SW
3、620細胞增殖受到抑制,并呈一定的濃度和時間依賴性。3、流式細胞儀檢測顯示,經(jīng)2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L的丁酸鈉處理48小時后,SW620細胞S期比例明顯減少,分別從處理前的28.99%降至14.39%、6.54%、5.04%(p<0.05);而G0/G1期比例則逐漸增加,分別從處理前的51.11%增至65.71%、78.98%、90.40%(p<0.05)。4、經(jīng)不同濃度的丁酸鈉處理24小時后,p21
4、WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達均明顯上調(diào),VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表達出現(xiàn)下調(diào),與對照組比較有統(tǒng)計學意義(p<0.05);且隨丁酸鈉作用濃度增加,p21WAF1上調(diào)水平有逐漸增加趨勢,相反,VEGF表達水平呈逐漸下調(diào)趨勢。
結(jié)論:丁酸鈉能有效抑制人結(jié)腸癌細胞SW620的增殖,且呈一定的濃度、時間依賴性,其機制與上調(diào)p21WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達,使細胞周期阻滯在G0/G1期有關(guān)。丁酸鈉亦能下
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