變形鏈球菌耐氟菌株與親代菌株的基因組比較.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文變形鏈球菌耐氟菌株與親代菌株的基因組比較姓名：丁春燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床指導(dǎo)教師：于丹妮20060501天津聯(lián)科大學(xué)碩士研究生論文攘要目的：氟他物防齲已有很長(zhǎng)的歷史，長(zhǎng)期髑部隧濃度氟化物的傻用，可導(dǎo)致耐氟菌椽選擇性的生長(zhǎng)。耐氟菌株的文現(xiàn)，給戴化物防齲提出了凝的悶題，如何避免射氟胬株的出現(xiàn)兩又能充分發(fā)揮氟化物的防齲份用，探討耐氟菌株的耐氟機(jī)理慢曼褥極為重要。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用分子生物學(xué)技本對(duì)變形鏈球蘺澍氟精株與

2、親代棟的基因組、蛋囊組進(jìn)行眈較，判定變形鏈球蘸耐窳突變贍，其遺傳型是否發(fā)生顯著性改變。變形鏈球菌的致齲能力主要是它其有產(chǎn)酸和耐酸兩大特性，褥這種耐酸能力主要通避細(xì)藹的F筒曙8se得以實(shí)現(xiàn)。通過測(cè)定并比較變形鏈球菌耐氟菌株及其親代菌株的F艇PaSe的活性，并進(jìn)一步對(duì)其基囂綴進(jìn)行比較，探討耐氟蒲株耐酸生提離的舔因。為進(jìn)一步研究其基因改變的暴體部位及耐氟梳理褥供理論依據(jù)，為磷究變形鏈球蕊耐氟蔚株耐酸性的增強(qiáng)機(jī)制葜定基礎(chǔ)。方法：l提取變形鏈球藏

3、醚氟菌株與親伐菌株的整體基因組，運(yùn)用APPcR技術(shù)慰其DNA進(jìn)行對(duì)比研究；2提取變形鏈球菌纛重氟菌株與親代菌株盼可溶惶蛋白綴和不可溶性蛋白組，運(yùn)用sDsPAGE技術(shù)進(jìn)行對(duì)比研究；3將交形鏈球蘑掰手氟菌株與親代鏊棟通過甲苯處理，2個(gè)循環(huán)的液氮冷凍和解凍，制備透性細(xì)胞。將透性纓臆懸液加入測(cè)試緩沖液中，測(cè)定不周時(shí)間段樣品中水解艘p所釋出的無機(jī)磷量來評(píng)價(jià)其膜上的ATPase活性高低：4自行設(shè)計(jì)F，姍Pase區(qū)域的弓l物，用PcR法對(duì)交形鏈球菌耐