鴉膽子有效部位的提取、分離純化及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、鴉膽子系苦木科鴉膽子屬植物(Brucea Javanica Merr(L.))鴉膽子的成熟果實(shí)。近年來,它作為一種抗腫瘤天然藥物,已引起了研究人員的廣泛關(guān)注。本文主要圍繞鴉膽子有效部位的提取、分離純化及其抗腫瘤作用而展開,其試驗(yàn)結(jié)果主要如下:
　　 采用溶劑加熱回流提取方法,以無水乙醇為提取溶劑對鴉膽子中水溶性成分進(jìn)行了提取。以鴉膽子苦味浸膏得率為考察指標(biāo),以提取溫度、液料比、提取時間、提取次數(shù)為考察因素,采用正交試驗(yàn)法L9(3

2、4)確定了最佳提取工藝:提取次數(shù)3次,液料比7:1,提取時間每次2h,提取溫度60℃。在此工藝參數(shù)條件下,苦味浸膏得率達(dá)到17.4％。
　　 以鴉膽苦醇為對照品,運(yùn)用香草醛-冰醋酸、高氯酸比色法對鴉膽子中總?cè)祁愇镔|(zhì)含量進(jìn)行了測定。并從儀器精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和平均加樣回收率四方面,考察了該方法的可行性。試驗(yàn)結(jié)果分別如下:儀器精密度RSD0.70％、重復(fù)性RSD1.32％、穩(wěn)定性RSD4.19％、平均加樣回收率RSD1.17％

3、,四個方面的RSD都小于5％。由此表明,該方法所測數(shù)據(jù)可靠性高,結(jié)果重現(xiàn)性好,為鴉膽子及其提取物的內(nèi)在質(zhì)量控制方法建立提供了方法學(xué)上的保障。經(jīng)該方法測得鴉膽子苦味浸膏總?cè)祁愇镔|(zhì)成分的平均含量為3.68％。
　　 通過液-液分配萃取試驗(yàn),將鴉膽子苦味浸膏分為Cp1、Cp2、Cp3、Cp4、Cp5、Cp6共6個部位；通過體外細(xì)胞增殖抑制試驗(yàn),確定了抑瘤活性最強(qiáng)部位為三氯甲烷層Cp2。以Cp2部位為進(jìn)一步分離純化對象,經(jīng)硅膠柱純化后