腎癌患者外周血漿miR-144作為腎癌早期診斷標志物的篩選及鑒定.pdf

1、目的：目前腎癌仍缺乏簡易、非侵襲性的早期診斷和治療隨訪的標志物。我們研究腎透明細胞癌術(shù)前術(shù)后血漿中miRNAs表達譜的差異，篩選出能夠作為腎透明細胞癌早期診斷及其治療隨訪的生物學標志物。
　　方法：本實驗用microarray芯片（包含1523個人類成熟miRNA探針）檢測5對腎透明細胞癌及3對腎錯構(gòu)瘤術(shù)前及術(shù)后7天血漿（所有患者的腫瘤直徑均小于3cm）中miRNAs的表達，并利用統(tǒng)計學分析方法分析腎癌術(shù)前術(shù)后血漿中miRNAs的

2、表達差異(按篩選條件fold change>2,p<0.05)。然后利用實時定量PCR進一步驗證血漿（包含50對腎癌術(shù)前術(shù)后血漿、20例腎錯構(gòu)瘤血漿及30例健康人血漿）中miR-144的表達變化。
　　結(jié)果：對比腎癌術(shù)前及術(shù)后血漿miRNAs表達譜，5個miRNAs具有顯著差異。其中1個miRNAs在腎癌術(shù)前血漿中下調(diào)，4個miRNA上調(diào)；實時定量PCR顯示miR-144在腎透明細胞癌血漿表達水平明顯上調(diào)，顯著高于其術(shù)后水平和對照

3、（包括腎錯構(gòu)瘤及健康人）水平，同時miR-320c在腎癌及腎錯構(gòu)瘤術(shù)前術(shù)后血漿中表達穩(wěn)定，同時miR-320c在腎癌及腎錯構(gòu)瘤術(shù)前術(shù)后血漿中表達穩(wěn)定，可作為外周血漿中miRNAs表達量的內(nèi)參照。
　　結(jié)論：成功建立一套標準化提取及檢測外周血漿中miRNAs的方法，發(fā)現(xiàn)hsa-miR-320c可以作為檢測外周血漿中miRNAs表達量的內(nèi)參照，而syn-cel-miR39可以作為外參照，為外周血漿中miRNAs作為腫瘤標志物的研究提供