實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)檢測(cè)中草藥青蒿及馬鈴薯叢枝植原體的研究.pdf

1、中草藥青蒿(ArtemisiaannuaL.)，是我國(guó)獨(dú)有的抗瘧藥用植物資源。馬鈴薯叢枝植原體(Potatowitches'-broomphytoplasma，PWB)，為我國(guó)出入境有害生物檢疫對(duì)象。在出入境檢驗(yàn)檢疫中，應(yīng)對(duì)這兩種生物進(jìn)行嚴(yán)格檢疫。 本研究分別根據(jù)蒿屬植物rDNAITS序列及植原體16SrDNA序列多態(tài)性設(shè)計(jì)特異性TaqMan探針及引物，通過實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)黃花蒿及馬鈴薯叢枝植原體進(jìn)行檢測(cè)，取得了以下研究進(jìn)展

2、。 1.本文對(duì)9種蒿屬植物的ITS序列和13種植原體的16SrDNA序列進(jìn)行了測(cè)定及比對(duì)，分別根據(jù)特異性位點(diǎn)設(shè)計(jì)探針—引物組，對(duì)A.annua及PWB進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)。兩組試驗(yàn)結(jié)果表明，兩組探針—引物分別對(duì)黃花蒿和馬鈴薯叢枝植原體有很強(qiáng)的特異性，除黃花蒿和馬鈴薯叢枝植原體外，作為對(duì)照的其余8種蒿屬材料和19種病原物均未檢測(cè)到熒光信號(hào)。 2.對(duì)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)體系的優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果表明，檢測(cè)效果在鎂離子濃度為3mM，探