人工培育的大蟬蟲草抗菌性研究及其化學(xué)成分分析.pdf

1、大蟬蟲草（Cordyceps cicadae(Miq.) Massee）是寄生于大型蟬若蟲上的一種蟲生真菌。本文對(duì)人工培育的大蟬蟲草的抗菌活性、揮發(fā)性物質(zhì)和主要化學(xué)成分等方面進(jìn)行了較為系統(tǒng)而深入的研究，內(nèi)容具體包括：大蟬蟲草無性型菌株RCEF6202的液體、固體和人工誘導(dǎo)子實(shí)體培養(yǎng)，并對(duì)這3種不同人工培養(yǎng)物分別進(jìn)行抑菌試驗(yàn)篩選（杯碟法），根據(jù)抑菌效果選出研究抗菌活性的最佳指示菌；利用質(zhì)譜導(dǎo)向的制備型高效液相色譜對(duì)大蟬蟲草發(fā)酵液乙酸乙酯萃

2、取物中的活性組分進(jìn)行了跟蹤分離，從而制備得到較純的抗菌活性化合物，并根據(jù)該化合物的理化性質(zhì)和HPLC-MS、NMR等相關(guān)波譜數(shù)據(jù)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)；選用同時(shí)蒸餾萃取法進(jìn)行提取3種不同人工培養(yǎng)物的揮發(fā)性成分，利用氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行分析；對(duì)大蟬蟲草3種人工培養(yǎng)物的主要化學(xué)成分進(jìn)行分析與比較。
　　抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明：大蟬蟲草平板菌絲體、搖瓶菌絲體和子實(shí)體的水和甲醇提取物對(duì)枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、蘇云金芽孢桿菌、黑

3、曲霉、白色念珠菌等6種指示菌都沒有抑制作用；大蟬蟲草平板菌絲體和搖瓶菌絲體的乙酸乙酯萃取物對(duì)黑曲霉和白色念珠菌有微弱的抑制作用；大蟬蟲草搖瓶發(fā)酵液的乙酸乙酯萃取物對(duì)黑曲霉和白色念珠菌也均有抑制作用，但其對(duì)白色念珠菌的抑菌效果更好，抑制作用最為明顯，即選取白色念珠菌為研究抗菌活性的最佳指示菌。
　　以抑制白色念珠菌為指標(biāo)，利用質(zhì)譜導(dǎo)向的制備高效液相色譜對(duì)大蟬蟲草發(fā)酵液乙酸乙酯萃取物中的活性組分進(jìn)行了跟蹤分離，并獲得了純度較高的抗菌活

4、性化合物。同時(shí)利用了質(zhì)譜分析和核磁共振分析，確定了該抗菌化合物為多球殼菌素。
　　GC-MS分析結(jié)果表明：大蟬蟲草搖瓶發(fā)酵菌絲、平板菌絲和子實(shí)體分別鑒定出18種、13種和16種揮發(fā)性物質(zhì)。3種人工培養(yǎng)物揮發(fā)性物質(zhì)的類型主要為醇類化合物、苯類化合物、酯類化合物、醛類化合物、醚類化合物和酸類化合物等。大蟬蟲草3種人工培養(yǎng)物揮發(fā)性物質(zhì)均含有1-辛烯-3-醇、2-癸烯-5-內(nèi)酯、丁羥基甲苯、棕櫚酸和4-羥基-3-叔丁基-苯甲醚5種化合物，

5、該5種化合物總量占各自總揮發(fā)性物質(zhì)的69.85％、77.11%和79.87%，對(duì)大蟬蟲草濃郁氣味起到主導(dǎo)作用。
　　主要成分分析結(jié)果表明：3種人工培養(yǎng)物的粗蛋白相差不大；粗脂肪的含量從大到小依次為平板菌絲體（2.65 g/100g）、搖瓶發(fā)酵菌絲體（2.50 g/100g）和子實(shí)體（1.64 g/100g）；多糖在大蟬蟲草3種人工培養(yǎng)物中的含量為子實(shí)體（8.66g/100g）>搖瓶發(fā)酵菌絲體（7.53g/100g）>平板菌絲體（7

6、.22g/100g）；腺苷在搖瓶發(fā)酵菌絲體中含量最高，平板菌絲體和子實(shí)體中稍低，胞苷在子實(shí)體體中的含量最高，顯著高于搖瓶發(fā)酵菌絲體和平板菌絲體；搖瓶發(fā)酵菌絲體（34.97g/100g）和子實(shí)體（34.91g/100g）中的氨基酸含量相當(dāng)，略高于平板菌絲體（34.27g/100g），必需氨基酸的含量以子實(shí)體（12.82 g/100g）中最高、搖瓶發(fā)酵菌絲體（11.42g/100g）次之、平板菌絲體（10.56g/100g）最少；大蟬蟲草3