中心體異常和食管癌發(fā)生相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的:中心體(centrosome)是一個(gè)微小的細(xì)胞器。Boveri作為中心體的先驅(qū)研究者首先將這個(gè)微小的細(xì)胞器置于聚光燈下,一個(gè)世紀(jì)以來(lái),中心體這一微小的細(xì)胞器令無(wú)數(shù)細(xì)胞生物學(xué)家著迷。中心體由一對(duì)中心粒(centrioles)和中心粒周?chē)镔|(zhì)(pericentriolar material, PCM)組成。中心粒由九組三聯(lián)體(或雙聯(lián)體,或單體,取決于細(xì)胞類(lèi)型)微管組成,形成開(kāi)放的桶狀結(jié)構(gòu),每組三聯(lián)體微管相互之間斜向排列,略似風(fēng)輪

2、。各亞微管又由13根直徑約4.5nm的原纖維組成,中心粒內(nèi)無(wú)中央微管,也無(wú)特殊的臂。中心粒的直徑約為100-150nm,長(zhǎng)度約為100-400nm,成對(duì)并彼此相互垂直排列。中心粒周?chē)h(huán)繞著中心粒周?chē)镔|(zhì)(pericentriolar material, PCM)和高電子密度物質(zhì)(electron-dense material)。中心體的主要功能是作為主要的微管組織中心(microtubule organizing centres, MT

3、OCs)。作為主要的MTOCs,中心體在維持細(xì)胞有絲分裂的忠實(shí)性和細(xì)胞極性上起著重要的作用。當(dāng)中心體的結(jié)構(gòu)和功能異常時(shí),可引起細(xì)胞有絲分裂異常和細(xì)胞極性紊亂,并導(dǎo)致細(xì)胞染色體不穩(wěn)(chromosome instability, CIN),最終導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生。本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)食管癌不同階段中心體結(jié)構(gòu)異常的研究,來(lái)探討中心體結(jié)構(gòu)異常在食管癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用和意義,為臨床醫(yī)學(xué)提供診斷和治療的基礎(chǔ)理論依據(jù)。
　　材料與方法:從所收取

4、的食管癌標(biāo)本中隨機(jī)選取同1例標(biāo)本中同時(shí)具有食管癌不同階段的標(biāo)本(即同時(shí)具有癌旁食管正常粘膜,食管不典型增生,食管原位癌和食管浸潤(rùn)癌4個(gè)階段)進(jìn)行中心體特性的詳細(xì)研究。一抗為抗中心體周?chē)鞍锥嗫寺】贵w(Polyclonal Antibody against Pericentrin),二抗分別為生物素化山羊抗兔 IgG抗體(Biotinylation Goat Anti-Rabbit IgG Antibody)和FITC標(biāo)記抗兔 IgG抗體

5、(Anti-Rabbit IgG Antibody, FITC Labeled)。中心體分別采用免疫組化(SABC法)和間接免疫熒光法進(jìn)行染色。各實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性染色結(jié)果經(jīng)SigmaScan Pro5圖像分析軟件對(duì)圖像進(jìn)行處理后,以中心體面積(areas)和體積(volumes)值作為統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件包,進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),各實(shí)驗(yàn)組中心體面積(areas)和體積(volumes)值以均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差( x±s

6、)來(lái)表示。食管浸潤(rùn)癌組、食管原位癌組、食管不典型增生組、癌旁食管正常粘膜組之間細(xì)胞中心體結(jié)構(gòu)上是否存在差異采用配對(duì)樣本 T檢驗(yàn)(Paired-Samples T Test)和單向方差分析(Analysis of One-way Variance)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。中心體異常和食管癌發(fā)生之間是否存在相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析(Spearman Rank Correlation Analysis)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有的統(tǒng)計(jì)分析都采用S

7、PSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行,統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用x±s表示,P﹤0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P﹤0.01有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:通過(guò)相關(guān)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,其結(jié)果如下:癌旁食管正常粘膜組和食管浸潤(rùn)癌組細(xì)胞之間中心體結(jié)構(gòu)異常具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01),Spearman等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析中心體結(jié)構(gòu)異常和食管癌發(fā)生之間具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01);癌旁食管正常粘膜組和食管原位癌組細(xì)胞之間中心體結(jié)構(gòu)異常具有高度統(tǒng)計(jì)

8、學(xué)意義(P﹤0.01),Spearman等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析中心體結(jié)構(gòu)異常和食管原位癌發(fā)生之間具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01);癌旁食管正常粘膜組和食管不典型增生組細(xì)胞之間中心體結(jié)構(gòu)異常無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05),Spearman等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析中心體結(jié)構(gòu)異常和食管不典型增生之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05);方差統(tǒng)計(jì)分析具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01),不同階段中心體結(jié)構(gòu)具有顯著性差異,Spearman等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析中心體結(jié)構(gòu)異常和