mPEG-BSA-5-FU的合成及其抗癌活性初探.pdf

1、目的：為延長(zhǎng)5-FU的半衰期，減小其達(dá)峰濃度，制備了mPEG-BSA-5-FU復(fù)合物，探討其體外藥效學(xué)特性，并初步研究其在小鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。 方法：用NHS活化方法制備了5-FUAC活性酯，在pH9.0的硼酸緩沖液中和白蛋白偶聯(lián)。用NHS活化方法制備了mPEG活性酯，在pH8.0的硼酸緩沖液中和所制備的BSA-5-FU反應(yīng)得mPEG-BSA-5-FU復(fù)合物。以小鼠腹水型肝癌細(xì)胞株（H22）建立實(shí)體瘤動(dòng)物模型，以5-FU，

2、5-FU-BSANAP為對(duì)照組，通過計(jì)算抑瘤率考察mPEG-BSA-5-FU的藥效學(xué)。用mPEG-BSA-5-FU以及5-FU原藥給正常雌雄各半昆明小鼠進(jìn)行腹腔注射，每只小鼠予含相當(dāng)于3 mg5-FU量的5-FU原藥和mPEG-BSA-5-FU。采用高效液相法測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)血漿藥物濃度，繪制兩組藥物的時(shí)間-濃度曲線，按中國(guó)藥理學(xué)會(huì)提供的3P97程序計(jì)算各組藥物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)方法得到了偶聯(lián)率為32.89 μg/m

3、g的BSA-5-FU，修飾度為43.37％的mPEG-BSA-5FU。同等劑量下mPEG-BSA-5-FU的抑瘤率為40.3％。明顯高于5-FU組（33.63％）及5-FU-BSANAP組（20.54％），且其結(jié)果數(shù)據(jù)分析具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。HPLC對(duì)5-FU檢測(cè)方法的最低檢測(cè)限為0.05mg/L,出峰時(shí)間約在5.6min左右。其回收率、日內(nèi)系數(shù)、日間系數(shù)分別為103.7％、5.64％、6.35％。5-FU原藥的血藥峰濃度出現(xiàn)在

4、5.8 min之內(nèi)，此后血藥濃度迅速降低。mPEG-BSA-5FU的峰濃度出現(xiàn)在腹腔注射后99.5 min，并在較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)（1～12 h）維持較高的濃度。mPEG-BSA-5-FU組藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示其半衰期T1/2（332.85 min）明顯高于5-FU原藥組的T1/2（9.88 min）,達(dá)到了明顯的長(zhǎng)循環(huán)效果。血藥濃度峰值（Cmax：4.6 mg/L）明顯比5-FU原藥組(57.8 mg/L)低而藥物濃度曲線下面積（AUC:2

5、721 mg*min/L）明顯比5-FU原藥組（AUC：1237 mg*min/L）增加。 結(jié)論：偶聯(lián)反應(yīng)及修飾反應(yīng)的工藝簡(jiǎn)單，但結(jié)果不是很穩(wěn)定，所得的目標(biāo)產(chǎn)物為一復(fù)合物，且有批量差異。藥效學(xué)結(jié)果顯示所得目標(biāo)產(chǎn)物mPEG-BSA-5-FU的抑瘤率明顯高于5-FU原藥組和5-FU-BSANAP組。藥動(dòng)學(xué)結(jié)果顯示目標(biāo)產(chǎn)物mPEG-BSA-5-FU的T1/2明顯延長(zhǎng)，達(dá)峰時(shí)間延長(zhǎng)，Cmax有很大幅度的降低，AUC增加，有可能克服5-F