轉(zhuǎn)錄因子T-bet-Gata-3在急性肺損傷中的失衡表達(dá)和調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討T細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet/Gata-3在急性肺損傷中的表達(dá)，進(jìn)一步用地塞米松與脂質(zhì)前列腺素Ei兩種藥物分別對(duì)急性肺損傷進(jìn)行干預(yù)，探討其對(duì)轉(zhuǎn)錄因子T-bet/Gata-3的影響及其對(duì)Th1/Th2平衡的調(diào)節(jié)作用。 方法：60只雌性BALB/C小鼠隨機(jī)分成四組：A組：對(duì)照組（生理鹽水組），B組：模型組[脂多糖（LPS）組]，C組：激素組（LPS+地塞米松組），D組：前列腺素E1組[LPS+脂質(zhì)前列腺素E1 （PGE1

2、）組]。采用尾靜脈注射LPS方法制備BALB/C小鼠急性肺損傷模型，其中C、D組于注射LPS后1小時(shí)分別給予地塞米松與PGE1進(jìn)行干預(yù)。各組于6小時(shí)后觀察肺組織變化，并測定肺濕/干比重和肺系數(shù)。采用流式細(xì)胞儀檢測Th1、Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)。SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)建立組織因子T-bet和Gata-3標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)曲線，并檢測它們mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1、急性肺損傷模型制備良好，病理證實(shí)有肺出血

3、、水腫、滲出及中性粒細(xì)胞浸潤，而且肺濕重/肺干重較對(duì)照組增加（5.74±0.31 vs 4.79±0.27，P<0.05）。與模型組比較，地塞米松與脂質(zhì)前列腺素E1可減輕上述改變。 2、模型組Th1、Th2細(xì)胞的陽性率較對(duì)照組顯著降低（16.65±1.7 vs23.67±2.1，9.4±1.25 vs 12.17±1.8，P<0.05），以Th1細(xì)胞降低更明顯，Th1/Th2明顯下降（1.733±0.03 vs 1.945±0.

4、04，P<0.05）。 3、相對(duì)于模型組，地塞米松干預(yù)組的Th1、Th2細(xì)胞陽性率均明顯下降（12.52±1.5 vs 16.65±1.7，7.5±0.8 vs 9.4±1.25，P<0.05），Th1/Th2明顯降低（1.667±0.05 vs 1.733±0.03，P<0.05）；而PGE1組Th1細(xì)胞陽性率升高（20.31±2.2 vs 16.65±1.7，P<0.05），Th2細(xì)胞陽性率亦升高（10.5±0.8 vs 9

5、.4±1.25，P<0.05），Th1/Th2升高（1.933±0.05 vs 1.733±0.03，P<0.05）。 4、較對(duì)照組，模型組轉(zhuǎn)錄因子T-bet與Gata-3低轉(zhuǎn)錄（1.1831±0.49452 vs 3.4393±0.55731，0.6927±0.28513 vs 1.2027±0.23827，P<0.05），T-bet/Gata-3基因表達(dá)量比值低下（1.7132±0.13057.vs 2.8569±0.2

6、8988，P<0.05）；與模型組比較，地塞米松抑制轉(zhuǎn)錄因子T-bet基因的表達(dá)（0.7415±0.2489 vs 1.1831±0.49452，P<0.05），T-bet/Gata-3比值降低（1.2605±0.15206 vs 1.7132±0.13057，P<0.05），脂質(zhì)前列腺素E1增加了T-bet基因的表達(dá)（1.8265±0.70469 vs 1.1831±0.49452，P<0.05），T-bet/Gata-3比值明顯增高

7、，差異有顯著性（2.5024±0.35236 vs1.7132±0.13057，P<0.05）。 結(jié)論： 1、急性肺損傷小鼠中T-bet和Gata-3mRNA低表達(dá)，T-bet/Gata-3mRNA比值也下降，證實(shí)急性肺損傷存在T-bet/Gata-3mRNA表達(dá)失衡。 2、地塞米松抑制了T-betmRNA的表達(dá)，從而降低了T-bet/Gata-3mRNA的比值，使Th1/Th2比值降低，即通過上游機(jī)制調(diào)控ALI