CT259、CT703基因在沙眼衣原體感染細胞中的表達研究.pdf

1、目的: 分析沙眼衣原體（Chlamydia trachomatis，Ct）L2血清型在急性感染和持續(xù)感染兩種狀態(tài)下，其基因CT259、CT703的mRNA及蛋白表達，為進一步研究兩基因的生物學效應奠定實驗基礎。 方法: 1.用IFN-γ處理Ct感染的HeLa細胞，吉姆薩染色光學顯微鏡觀察、以及電鏡觀察，確定沙眼衣原體持續(xù)感染細胞模型建立。 2.采用RT-PCR方法檢測基因CT259、CT703 mRNA在

2、不同細胞模型中的表達。 3.采用Western-blot的方法檢測基因CT259、CT703編碼蛋白在不同細胞模型中的表達。 結果: 1.成功建立Ct持續(xù)感染細胞模型。 2.RT-PCR結果顯示：Ct持續(xù)感染狀態(tài)下，在宿主細胞中6h開始檢測到CT259的表達，12小時開始檢測到CT703的表達，持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703的表達量無時間依賴性；Ct急性感染狀態(tài)下，在宿主細胞中6小時開始檢測到CT2

3、59的表達，12小時開始檢測到CT703的表達，隨感染時間的延長CT259、CT703 mRNA表達量逐漸增加，具時間依賴性。將持續(xù)感染與急性感染各相同時間點CT259、CT703 mRNA灰度值相比較，發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703 mRNA表達水平明顯低于急性感染狀態(tài)，差別具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 3.Western-blot結果顯示：Ct持續(xù)感染狀態(tài)下，在宿主細胞內(nèi)24h可檢測到CT259和CT703的表

4、達，表達量無時間依賴性；Ct急性感染狀態(tài)下，24h可檢測到CT259和CT703的表達；隨感染時間的延長，蛋白質表達量逐漸增加，具時間依賴性；相同時間點持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703編碼蛋白的量明顯低于急性感染狀態(tài)。 結論: 1.成功建立沙眼衣原體持續(xù)感染細胞模型。 2.Ct持續(xù)感染狀態(tài)下基因CT259、CT703 mRNA水平顯著低于急性感染狀態(tài)。 3.Ct持續(xù)感染狀態(tài)下基因CT259、CT703