兔SAH腦血管痙攣后基底動脈中磷酸二酯酶V表達及活性變化的研究.pdf

1、目的:探討在小動物（如兔）SAH后CVS模型上經股動脈入路行選擇性椎—基底動脈造影的可行性；探討TCD對兔SAH后CVS狀況的評價效度；探討兔CVS后不同時期基底動脈中磷酸二酯酶V的表達及活性變化，判斷其與腦血管痙攣的關系。 方法:通過“枕大池二次注血法”制成兔SAH后CVS模型，空白對照組于術前1天，實驗對照組、SAH組于制模后第1天、3天、5天、7天、9天、11天行TCD與選擇性椎—基底動脈造影，通過測量基底動脈血流速度和血

2、管直徑，檢測兔腦血管痙攣的發(fā)生及變化，每次檢測完后，先行心臟灌注處死動物，然后開顱取其基底動脈，用于常規(guī)病理檢查及免疫組化的標本直接投入10％的福爾馬林中，一周后制成病理切片，備做檢查。用于Real—time RT—PCR及活性測定的標本則迅速置于液氮中冰凍，待硬結后置于—80℃低溫冰箱中保存?zhèn)溆?。通過免疫組化、Real—Time RT—PCR檢測兔基底動脈中磷酸二酯酶Ⅴ的表達及量的變化，通過高效液相色譜法檢測其活性變化。 結果

3、:在家兔CVS動物模型上成功完成左側椎動脈選擇性插管和造影，可有效地判斷CVS的嚴重程度；采用TCD連續(xù)監(jiān)測基底動脈血流速度可獲得穩(wěn)定圖譜，能觀察到制模后血流速度的變化情況；正常兔經DSA測得基底動脈管徑均值為0．82±0．08mm，經TCD測得基底動脈平均血流速度（Vm）為27．39±6．25 cm/s，SAH組于二次注血后24小時即出現(xiàn)兔基底動脈管徑變細，顯影時間延遲，血流速度加快，上述現(xiàn)象于術后第3天達到高峰，一直持續(xù)至術后第7天

4、，此后逐漸緩解，至第11天時恢復正常。磷酸二酯酶Ⅴ在SAH組兔基底動脈中明顯表達，且其從術后24小時開始，含量增加，活性增強，第3—7天達高峰，此后逐漸降低，至第11天時基本恢復正常；空白對照組與實驗對照組中兔基底動脈血管直徑和血流速度未見明顯變化，其上未見PDEV明顯表達，含量與活性也無變化。 結論:本實驗證實經兔股動脈入路行選擇性椎—基底動脈造影是完全可行的，TCD可連續(xù)監(jiān)測兔基底動脈血流速度，對兔SAH后CVS狀況的評價穩(wěn)