豬卵巢發(fā)育的組織學觀察及磷酸二酯酶3A的表達研究.pdf

1、卵泡發(fā)育是一個以形態(tài)變化為特征的生長過程，同時伴隨著卵泡功能的分化.原始卵泡一旦啟動生長，便是一個連續(xù)不斷的發(fā)育和分化過程，要么變成優(yōu)勢卵泡，使卵子排放與成熟，要么中途閉鎖。每個性周期啟動生長一組原始卵泡，同時生長啟動的多數(shù)卵泡將不會達到排卵階段，而是在發(fā)育過程中的不同時期發(fā)生凋亡。卵泡發(fā)育過程的調節(jié)是一個復雜的過程，包括內分泌因素（促性腺激素）和卵巢內調節(jié)因子（性激素、生長因子和細胞因子），他們共同調控卵母細胞的生長發(fā)育.
　　

2、 PDE3A是卵巢內表達的主要磷酸二酯酶亞型，其在卵巢發(fā)育生長過程中能降解cAMP，使cAMP濃度下降，從而下調FSH、LH濃度，達到維持細胞正常功能的作用。此外，PDE3A基因敲除小鼠排出的卵母細胞在體外不能自發(fā)減數(shù)分裂成熟，一直處于GV期，除非抑制PKA活性，卵母細胞才能繼續(xù)發(fā)育成熟.說明在小鼠卵母細胞中PDE3A通過調控cAMP水平影響PKA活性，從而對調節(jié)卵母細胞成熟起重要作用。
　　 本實驗采用的實驗動物為二花臉母豬

3、，二花臉豬是我國優(yōu)良地方豬種，屬太湖豬中的優(yōu)秀種群，它以高繁殖性能而著稱于世，譽之為“豬中之國寶”、“世界豬種產仔之王”.經國營常熟畜禽良種場純繁的二花臉豬平均窩產總仔數(shù)和成活仔數(shù)分別達15.93和14.12頭；初情日齡和個體重分別為64天和15千克；子一代雜交母豬繁殖性能的雜交優(yōu)勢特別顯著，同時耐粗飼、適應性強、肉質鮮美.故選用二花臉母豬作為實驗動物具有一定的代表意義。
　　 本研究取用不同日齡的豬卵巢，通過染色觀察不同發(fā)育階

4、段的豬卵巢在組織學上的變化過程，旨在探討豬卵巢卵泡發(fā)育的動態(tài)變化特點；并通過測定PDE3A亞型在不同日齡的母豬卵巢組織中的表達，研究PDE3A在調控卵泡發(fā)育及成熟過程中的特殊意義，為提高產仔率提供理論基礎，從而提高畜群的繁衍速度，增加畜牧業(yè)生產的效益。
　　 為了研究母豬卵巢在不同發(fā)育階段的組織學變化規(guī)律和探討磷酸二酯酶3A(PDE3A)在卵巢發(fā)生發(fā)育和成熟過程中的生物學意義，本研究選二花臉母豬胎90日齡、新生1日齡、生后20、

5、120和180日齡的母豬卵巢，進行組織學觀察，并利用RT-PCR檢測PDE3AmRNA的表達情況。結果顯示，胎90日齡主要由原始卵泡組成；出生1日齡、20日齡、120日齡階段發(fā)育明顯，180日齡卵巢內觀察到的形態(tài)特點與120日齡相似。另外，豬卵巢不同日齡都有PDE3A mRNA和內參基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)的表達。經灰度值掃描，統(tǒng)計學分析顯示，PDE3A mRNA相對含量差異有顯著性(P＜0.01)。各組間兩兩比較結果（