抗癌藥物放線菌素D新類似物DNA結(jié)合活性及體外轉(zhuǎn)錄抑制活性的研究.pdf

1、 為了得到高效低毒的放線菌素D類似物，以放線菌素D和DNA復合物結(jié)構(gòu)及放線菌素D類似物的構(gòu)效關系為基礎，合成了兩個放線菌素D類似物([D-Phe2，L-Me-Leu5]2AMD和[D-Phe2，D-Me-Leu5]2AMD)以及母體。合成采用液相的方法，所有中間產(chǎn)物用質(zhì)譜、1HNMR和[α]D表征，終產(chǎn)物用高分辨質(zhì)譜(HR-MS)、1HNMR和[α]D表征。 我們已經(jīng)研究了十四個類似物抗腫瘤活性，為了更加明白類似物抗腫瘤活

2、性產(chǎn)生差異的分子基礎，本實驗中采用UV-Vis光譜法測定了類似物和小牛胸腺DNA的作用方式和作用強度，用pGEM質(zhì)粒/T7RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)測定了類似物抑制體外轉(zhuǎn)錄活性。 可見光譜顯示2位保持不變，延長或者縮短環(huán)肽中5位氨基酸側(cè)鏈的長度，用MeLeu、D-MeLeu、Me-alloIle和Sar替換原有的MeVal的類似物與母體作用方式相同，以嵌入作用與DNA結(jié)合；2位Phe取代的所有類似物從這種較強作用力變?yōu)檩^弱的側(cè)面結(jié)

3、合作用。得到了抑制轉(zhuǎn)錄50％的藥物濃度(IC50)，發(fā)現(xiàn)放線菌素D類似物抑制轉(zhuǎn)錄活性與DNA結(jié)合活性密切相關，相比較于DNA結(jié)合活性，體外轉(zhuǎn)錄抑制活性與抗腫瘤活性MTT結(jié)果的關系更密切。2位保持不變的類似物抑制轉(zhuǎn)錄活性優(yōu)于母體或者與母體相當。環(huán)肽2位D-Phe的類似物中，其5位取代為：Sar、D-MeAla、D-MeVal、MeLeu、D-MeLeu、Me-alloIle、L-MePhe、D-MePhe、D-Val和D-Phe的類似物，

4、抑制轉(zhuǎn)錄活性較母體下降4-7倍，類似物2-D-Phe-5-D-MePhe，2-D-Phe-5-D-Phe，2-D-Phe-5-D-Val抑制轉(zhuǎn)錄活性遠遠不及母體。由合成RNA的電泳圖譜我們推測某些類似物不僅抑制DNA模板的表達，而且有明顯降解RNA作用。兩個活性實驗均顯示出5位氨基酸的側(cè)鏈和N-甲基對放線菌素D的DNA結(jié)合活性和抑制轉(zhuǎn)錄活性有重要影響， 本論文的工作驗證并補充了放線菌素D抗腫瘤作用發(fā)揮的機制以及構(gòu)效關系的研究，為