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文檔簡介
1、急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)是伴有嚴(yán)重呼吸障礙的一個(gè)復(fù)雜多變的病理過程,損傷導(dǎo)致肺內(nèi)廣泛的炎癥反應(yīng),嚴(yán)重危及氣道上皮細(xì)胞的完整性和功能的正常。β-連環(huán)素(β-catenin,β-cat)是一種具有雙重功能的蛋白,它以兩種形式存在,一種為結(jié)合型,即與跨膜的上皮鈣粘附素(E-cadherin,E-cad)結(jié)合形成E-cad/β-cat復(fù)合體,是維持上皮極性和完整性的重要的細(xì)胞粘附結(jié)構(gòu);另一種為游離型,參與Wnt信號傳
2、導(dǎo)途徑,調(diào)控細(xì)胞增生和組織修復(fù)等過程。本研究通過觀察β-cat在細(xì)胞膜以及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的表達(dá)變化,同時(shí)檢測導(dǎo)致β-cat在胞質(zhì)內(nèi)聚積的相關(guān)激酶的表達(dá)變化,旨在闡明由脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘發(fā)的小鼠ALI時(shí),β-cat在氣道上皮損傷修復(fù)過程中可能發(fā)揮的作用及有關(guān)的調(diào)節(jié)機(jī)制。 方法:在建立LPS氣管注射致小鼠ALI模型基礎(chǔ)上,采用免疫組織化學(xué)及免疫熒光染色技術(shù),應(yīng)用光鏡、共聚焦顯微鏡檢測氣道上皮細(xì)胞膜上β
3、-cat及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)在的表達(dá)及共定位關(guān)系;應(yīng)用WesternBlotting技術(shù)檢測肺組織內(nèi)蛋白激酶C(PKC)、GSK3-β、磷酸化GSK3-β(P-GSK3-β)以及β-cat的蛋白含量。 結(jié)果:免疫組化與免疫熒光方法顯示與正常組小鼠相比,LPS致ALI的小鼠氣道上皮中,胞膜上β-cat及胞質(zhì)內(nèi)GSK3-β的表達(dá)均明顯下降,胞質(zhì)內(nèi)β-cat表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05);WesternBlotti
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