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1、目的: 觀察胃癌細(xì)胞株BGC823中survivin和p53基因的表達(dá)情況;研究p53基因?qū)urvivin基因表達(dá)的影響,探討survivin與p53之間可能的作用機(jī)制;構(gòu)建pcDNA3.0-survivin啟動(dòng)子質(zhì)粒。 方法:從胃癌細(xì)胞株BGC823中,用RT-PCR的方法觀察胃癌細(xì)胞BGC823中survivin基因和p53基因的表達(dá);用Western blot方法觀察survivin和p53蛋白的表達(dá)情況;用表達(dá)野生型p5
2、3的質(zhì)粒pcDNA3.0-rp53轉(zhuǎn)染BGC823細(xì)胞株,用空白pcDNA3.0作對(duì)照,細(xì)胞培養(yǎng)8、16、24小時(shí),分別采用real-timePCR和Western blot的方法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)survivin的mRNA和蛋白表達(dá)情況;應(yīng)用PCR的方法獲得survivin啟動(dòng)子序列,構(gòu)建含有該啟動(dòng)子的質(zhì)粒。 結(jié)論:胃癌細(xì)胞BGC823表達(dá)survivin基因和p53基因;在胃癌細(xì)胞株BGC823中,野生型p53能夠在轉(zhuǎn)染后16h抑
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