應(yīng)用單細(xì)胞分離技術(shù)檢測孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞.pdf

1、通過檢測孕婦外周血中的胎兒有核細(xì)胞的攜帶的遺傳信息進(jìn)行產(chǎn)前診斷是一項新興的有著廣闊前景的診斷技術(shù).但它目前還面臨許多問題,首先是分離純化方法的優(yōu)化.尋找一種保證高純度的分離方法是研究者所夢寐以求的.該研究動手單細(xì)胞分離法對51例孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞進(jìn)行檢測,再用巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增SRY基因證實其胎源性,對該分離方法的可行性與科學(xué)性進(jìn)行了研究探討.1、顯微操作分離單個胎兒有核紅細(xì)胞:用密度梯度離心法初步分離出51例中孕期婦女外周血

2、中的有核細(xì)胞層,制成細(xì)胞甩片后,作瑞氏染色,在光鏡下觀察胎兒有核紅細(xì)胞的形態(tài),并統(tǒng)計胎兒有核紅細(xì)胞個數(shù)與有核細(xì)胞個數(shù)的比值.在倒置顯微鏡下吸限單個胎兒有核紅細(xì)胞.結(jié)果提示(1)母血中存在胎兒有核紅細(xì)胞,但數(shù)量極少,約占0.0038﹪~0.0511﹪(2)孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞的分離純化較難,用單細(xì)胞分離法可解決這一難題.2、用巢式聚合酶鏈反應(yīng)檢測胎兒Y特異性序列(SRY基因)來證實所取單個細(xì)胞的胎源性:單個細(xì)胞用巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增