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文檔簡介
1、目的：初步探討線粒體自噬在褪黑素抗神經(jīng)元缺血再灌注損傷中的作用及作用機制。
方法：體外培養(yǎng)N2a細胞,模擬神經(jīng)元缺血再灌注損傷,采用激光共聚焦檢測線粒體自噬活性;Western blotting檢測自噬信號通路關(guān)鍵激酶PKB,GSK-3β的活性變化;采用RT-PCR檢測GSK-3β的下游靶分子腫瘤錯配修復(fù)基因PMS2的表達。
結(jié)果：(1)激光共聚焦結(jié)果顯示:N2a細胞模擬缺血60min,再灌注24h,線粒體自噬明顯;
2、模擬缺血90min,再灌注24h,線粒體自噬不明顯,但在再灌注的同時加入Mel后,線粒體自噬明顯增加。
(2)Western blotting結(jié)果顯示,N2a細胞模擬缺血60min組,磷酸化的PKB的表達量低于正常對照組;Mel的治療組,磷酸化的PKB表達量不僅低于正常對照組,也低于模擬缺血60min組,P<0.05,差異顯著。而GSK-3β的活性變化正好與PKB變化相反,N2a細胞模擬缺血60min組和Mel治療組的GSK-
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