外源性硫化氫后處理經(jīng)線粒體對(duì)離體鼠心肌缺血-再灌注損傷的作用.pdf

1、目的: 探討外源性硫化氫供體——NaHS后處理對(duì)離體大鼠心肌缺血/再灌注損傷（Ischemia-reperfusion injury，I/R）的保護(hù)作用，及其保護(hù)作用與線粒體通透性轉(zhuǎn)換（mitochondrial permeability transition，MPT）的關(guān)系。
　　 方法: 56只Sprague Dawley（SD）大鼠隨機(jī)分為7組：正常對(duì)照組（CON）、缺血再灌注組（IR）、NaHS 1μmol/L后處理組（

2、SP1）、NaHS 10μmol/L后處理組（SP2）、NaHS 100μmol/L后處理組（SP3）、5μmol/L環(huán)孢菌素A組（CsA組）、25mg/kgPAG組（PAG組），每組8只。CON組以95％ O2和5％ CO2混合氣體飽和的K-H緩沖液（Krebs-Henseleit，K-H）恒溫（37℃）持續(xù)灌注110min；IR組37℃平衡灌注20min后，全心停灌30min，K-H液再灌60min；硫氫化鈉后處理組，在全心停灌30

3、min后，再灌注開始時(shí)給予含不同濃度硫氫化鈉的K-H液灌注10min，然后再灌注50min；CsA組于再灌注開始時(shí)給予含5μmol/L MPT抑制劑環(huán)孢菌素A的K-H液灌注10min，然后再灌注50min；PAG組在開胸取心臟前半小時(shí)腹腔注射25mg/kg胱硫醚-γ-裂解酶（cystanthionine-γ-lysase，CSE）抑制劑炔丙基甘氨酸（L-Propargylglycine，PAG），離體心臟37℃平衡灌注20min后，全心

4、停灌30min，K-H液再灌60min。未給予PAG的各組大鼠在開胸前半小時(shí)腹腔注射等量生理鹽水。通過UV22101紫外分光光度計(jì)（Shimadazu公司，日本）檢測線粒體的光密度在520nm波長處的變化測定線粒體通透性轉(zhuǎn)換的變化，持續(xù)觀察11min并記錄數(shù)值。Western blot檢測線粒體和胞漿細(xì)胞色素C（Cyto C）的釋放，心肌組織石蠟切片HE染色。
　　 結(jié)果: 缺血再灌注組（IR）誘發(fā)MPT，線粒體細(xì)胞色素C釋放增

5、多，胞漿細(xì)胞色素C含量增加（vs CON組，P<0.05）。硫氫化鈉后處理組MPT不明顯，線粒體細(xì)胞色素C釋放不多，胞漿細(xì)胞色素C增加不明顯（vs IR組，P<0.05），不同濃度組間比較差異無顯著性（P>0.05）。PAG組誘發(fā)MPT，線粒體細(xì)胞色素C釋放增多，胞漿細(xì)胞色素C含量增加（vs CON組，P<0.05），類似IR組。CsA組能阻斷MPT，線粒體細(xì)胞色素C釋放較少（vs IR組，P<0.05）。
　　 結(jié)論: 外源性