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1、目的:益氣化瘀法是中醫(yī)學(xué)治療腦梗死的有效治療原則,通過(guò)這一有效的治療方法,達(dá)到促腦梗死區(qū)血管新生的目的。近幾年來(lái),益氣化瘀療法已在外周血管閉塞性疾病和心肌缺血等缺血性疾病的治療中獲得成功,也是目前治療腦梗死的主要研究方向之一。在對(duì)益氣化瘀法研究的基礎(chǔ)上,為了進(jìn)一步研究揭示益氣或化瘀各自在益氣化瘀法中所發(fā)揮的作用,以及在促血管新生中的聯(lián)系與差異,以便更好地指導(dǎo)臨床實(shí)踐,本課題從對(duì)腦梗死大鼠腦組織半暗帶區(qū)VEGF的影響進(jìn)行觀察,在分子和細(xì)胞
2、水平上,將“益氣法”與“化瘀法”促血管新生的作用進(jìn)行了對(duì)比研究。 方法:1、理論研究采用文獻(xiàn)整理,結(jié)合臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的方法。2、本實(shí)驗(yàn)設(shè)6組:空白組、假手術(shù)組、模型組、益氣化瘀組、益氣組、化瘀組。以線栓法復(fù)制腦梗死大鼠模型。各治療組給予相應(yīng)的藥物灌胃,其余各組給予等量生理鹽水灌胃。給藥10天后,進(jìn)行以下檢測(cè):以RT-PCR法觀察大鼠腦組織VEGFmRNA表達(dá)的情況;以免疫組織化學(xué)法檢測(cè)“益氣法”與“化瘀法”對(duì)大鼠腦組織VEGF抗原
3、蛋白及CD31陽(yáng)性微血管密度的影響。通過(guò)以上指標(biāo)檢測(cè)來(lái)比較“益氣法”與“化瘀法”各自在促血管新生方面的作用。 結(jié)果:1·1益氣法與化瘀法各組均可以增加大鼠腦組織VEGF蛋白細(xì)胞的表達(dá)益氣組、化瘀組與空白組和假手術(shù)組比較均有非常顯著性差異(p<0.01);但是益氣組與化瘀組比較無(wú)顯著性差異(p>0.05);益氣組與益氣化瘀組比較有顯著性差異(p<0.05)。表明益氣組與化瘀組均可以促進(jìn)腦梗死大鼠腦組織半暗帶區(qū)的VEGF蛋白表達(dá)。益
4、氣組與化瘀組對(duì)VEGF蛋白表達(dá)的影響作用相差不大。 但益氣化瘀組對(duì)VEGF蛋白表達(dá)的影響比單純的益氣組或化瘀組作用強(qiáng)。 1·2益氣法與化瘀法對(duì)腦梗死大鼠腦組織CD31蛋白陽(yáng)性微血管密度(MVD)的影響CD31蛋白陽(yáng)性表現(xiàn)為細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色染色,主要在表達(dá)缺血半暗帶區(qū)或相當(dāng)處的內(nèi)皮細(xì)胞。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,益氣組與化瘀組的CD31免疫陽(yáng)性微血管密度(MVD)比空白組、假手術(shù)組和模型組比較均有非常顯著性的差異(p<0.01);但
5、益氣組與化瘀組比較有顯著性的差異(p<0.05)。表明益氣組、化瘀組均有促進(jìn)腦梗死大鼠腦組織半暗帶區(qū)新血管形成的作用;但是化瘀組促血管新生的作用比益氣組明顯;而益氣化瘀組促血管新生的作用比單純的益氣組或化瘀組作用強(qiáng)。 1·3益氣法與化瘀法對(duì)腦梗死大鼠腦組織VEGFmRNA表達(dá)的影響結(jié)果顯示,假手術(shù)組大鼠腦組織中VEGFmRNA表達(dá)水平與空白組基本相同;益氣化瘀組、化瘀組與假手術(shù)組和空白組比較有非常顯著性的差異(p<0.01);益
6、氣組與化瘀組比較有顯著性的差異(p<0.05);益氣化瘀組與化瘀組比較無(wú)顯著的差異(p>0.05)。表明益氣組與化瘀組VEGFmRNA表達(dá)水平均有所增強(qiáng),但是化瘀組對(duì)VEGFmRNA表達(dá)的影響作用比益氣組強(qiáng)。 結(jié)論:“益氣法”與“化瘀法”均可以增強(qiáng)腦梗死模型大鼠腦組織的微血管密度(MVD),對(duì)腦梗死大鼠腦組織VEGF蛋白表達(dá)有不程度的促進(jìn)作用,說(shuō)明兩者均可促進(jìn)腦梗死區(qū)血管新生的作用。但是化瘀法優(yōu)于益氣法。兩者的作用可能是通過(guò)上調(diào)
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